Влияние инкретинов на функцию тромбоцитов человека
Новые препараты для лечения больных сахарным диабетом представляют интерес для кардиологов, поскольку они снижают риск сердечно-сосудистых событий. Однако, как подтверждает текущая дискуссия о потенциальных преимуществах глитазонов, большие надежды могут не оправдаться. Первоначальные благоприятные эффекты на сердечно-сосудистую систему, показанные в исследованиях по проверке концепции, были приглушены очевидно более высокой смертностью в метаанализе исследований с розиглитазоном. Быстро растущее использование аналогов GLP-1 и ингибиторов DPP-4 (дипептидилпротеазы 4) для лечения сахарного диабета 2 типа может представлять большой интерес для кардиологов. Потенциальное благотворное воздействие на сердечно-сосудистую систему, показанное в экспериментах на животных, и небольшие исследования, подтверждающие концепцию, могут служить обоснованием для использования этих препаратов, особенно у пациентов с диабетом с вторичными осложнениями, такими как макрососудистые заболевания или диабетическая кардиомиопатия. Теоретически эти новые методы лечения могут также оказаться полезными у пациентов с сердечной недостаточностью, независимо от сопутствующего сахарного диабета. Тем не менее, в ближайшем будущем необходимо решить множество оставшихся без ответа вопросов, чтобы распространить экспериментальные результаты на потенциальную пользу для реальных пациентов. Таким образом, стал доступен новый класс противодиабетических препаратов, которые, возможно, могут непосредственно влиять на сердечно-сосудистые эффекты сахарного диабета и, таким образом, лечить или даже предотвращать опасные для жизни осложнения.
Затем наша рабочая гипотеза заключалась в том, что инкретины могут оказывать желаемое влияние на сердечно-сосудистую систему за счет модуляции функции тромбоцитов. Для проверки этой гипотезы мы предлагаем оценить наличие их специфических рецепторов в изолированных тромбоцитах человека. Кроме того, мы предложили изучить влияние эндогенных инкретинов (глюкагоноподобного пептида 1 и желудочного ингибиторного пептида) на функцию тромбоцитов человека, выделенных в пробирке.
Обзор исследования
Статус
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Цели и методы. Распространенность диабета 2 типа (СД2) продолжает расти во всем мире и влечет за собой параллельное увеличение связанных с ним осложнений сердечно-сосудистых заболеваний. Коррекция гиперактивности тромбоцитов является многообещающей для этой группы высокого риска пациентов с СД2, способствуя восстановлению нормального гемостаза, что привело к поиску новых антиагрегантных препаратов. Затем нашей целью было изучить, могут ли инкретины модулировать функцию тромбоцитов; для этого исследовали тромбоциты здоровых лиц, не принимавших никаких лекарств. Кроме того, были исследованы нормальные зрелые мегакариоциты, полученные путем культивирования гемопоэтических клеток-предшественников CD34+, полученных из пуповинной крови человека.
Для изучения функции тромбоцитов агрегацию тромбоцитов тестировали в отсутствие и в присутствии различных концентраций (от 10-9 мкМ до 10-5 мкМ) глюкагоноподобного пептида-1, ГПП1-(7-36)NH2 и глюкозозависимых инсулинотропных препаратов. полипептидный (GIP) агонист с помощью турбидиметрического анализа. Также оценивали влияние 300 мг/дл глюкозы, добавленной в среду. Экспрессию мРНК GLP1R (рецептор глюкагоноподобного пептида 1) и GIPR (рецептор GIP) оценивали с помощью ПЦР в реальном времени в суммарной мРНК тромбоцитов и мегакариоцитов. Предполагаемое присутствие их белков было проанализировано вестерн-блоттингом и проточной цитометрией в обоих образцах.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Здоровые доноры крови
Критерий исключения:
- Сахарный диабет
- Гипертония
- Морбидное ожирение
- Сердечно-сосудистые заболевания
- Гематологические заболевания и гиперлипидемия
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Временные перспективы: Поперечный разрез
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
контролирует
Здоровых добровольцев попросят сдать 10-80 мл крови через венозную пункцию.
|
Будет взята кровь для исследований in vitro.
Другие имена:
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Экспрессия рецепторов глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1) и желудочного ингибирующего пептида (GIP) в нормальных тромбоцитах человека
Временное ограничение: Тромбоциты, взятые у добровольца, оценивали 1 раз (через 1-2 дня)
|
1.1 Измерение рецепторов GLP-1 и GIP на уровне РНК тромбоцитов с помощью ПЦР в реальном времени 1.2 Обнаружение рецепторов GLP-1 и GIP на уровне белка: 1.2.1 Экспрессия на мембране тромбоцитов с помощью проточной цитометрии.
1.2.2
Определение общих белков тромбоцитов методом вестерн-блоттинга.
Данные проточной цитометрии представлены ниже.
|
Тромбоциты, взятые у добровольца, оценивали 1 раз (через 1-2 дня)
|
|
Изменения в базальной или индуцированной агрегатом активации тромбоцитов (с добавлением глюкозы в среду и без нее, 200 мг/дл, 400 мг/дл) под действием GLP-1-(7-36)NH2 и его метаболита (GLP-1-(9 -36)NH2) и агонист GIP в различных концентрациях.
Временное ограничение: Тромбоциты, взятые у добровольца, будут оцениваться 1 раз (через 1-2 дня)
|
1 Прямое влияние GLP-1-(7-36)NH2 и его метаболита (GLP-1-(9-36)NH2) и агониста GIP на агрегацию тромбоцитов с предварительной инкубацией и без нее при различных концентрациях глюкозы. 2. Модуляция ГПП-1-(7-36)NH2 и его метаболита (ГПП-1-(9-36)NH2) и агониста ГИП (с добавлением в среду 300 мг/дл глюкозы и без нее) активации и агрегации тромбоцитов. индуцируется классическими агонистами тромбоцитов, такими как АДФ, коллаген и бычий фактор фон Виллебранда. Точки данных из различных условий были объединены (усреднены), |
Тромбоциты, взятые у добровольца, будут оцениваться 1 раз (через 1-2 дня)
|
Соавторы и исследователи
Соавторы
Следователи
- Главный следователь: Carlos J Pirola, PhD, Unidad Ejecutora IDIM-CONICET
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оценивать)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Другие идентификационные номера исследования
- INC-PL-01
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .