Комплексный анализ резервуаров ВИЧ у хронически инфицированных пациентов, получавших лечение ВИЧ-1 (RESACHRON)
Комплексный анализ резервуаров ВИЧ у хронически инфицированных пациентов, получавших лечение ВИЧ-1, с низким уровнем общей клеточно-ассоциированной ДНК ВИЧ-инфекции в крови
ВИЧ-инфекцию можно эффективно контролировать с помощью антиретровирусной терапии (АРТ), при этом в 2013 г. почти 85 % пациентов имели подавленную виремию, однако ВИЧ нельзя искоренить только с помощью АРТ [1]. В целом ВИЧ превратился из смертельного заболевания в хроническое при условии, что лечение будет продолжаться всю жизнь. Несмотря на значительное улучшение антиретровирусных препаратов с точки зрения эффективности, переносимости и простоты, пожизненная терапия по-прежнему связана с токсичностью лекарств. Некоторые препараты или классы препаратов, которые исторически спасали жизни с 1996 г. и широко используются в настоящее время, такие как ингибиторы протеазы и аналоги нуклеозидов, связаны с долгосрочной токсичностью и повышенной частотой сопутствующих заболеваний.
В настоящее время во всем мире около 10 миллионов ВИЧ-инфицированных пациентов получают АРВТ. Это число должно увеличиться в ближайшие годы, поскольку самые последние рекомендации рекомендуют более раннюю терапию, учитывая преимущества с точки зрения прогрессирования заболевания и предотвращения передачи. Из-за увеличения числа пациентов, которые будут получать КАРТ в будущем, кумулятивной токсичности АРТ, трудностей с доступом к АРТ в некоторых регионах мира, выраженной пациентами усталости от АРТ и проблем со стоимостью, существует острая необходимость искать ЛЕЧЕНИЕ от ВИЧ. На сегодняшний день было сообщено только о двух случаях стерилизации излечения от ВИЧ: знаменитый «Берлинский пациент» после двух гомозиготных трансплантатов костного мозга Delta32-CCR5 по поводу острого лейкоза [2] и ребенок из Миссисипи после очень раннего начала КАРТ 31 часов после родов [3]. Однако эти случаи стерилизации лечения ВИЧ остаются исключительными, и альтернативная цель функционального лечения ВИЧ кажется более реалистичной, хотя все еще описывается в редких группах пациентов, таких как пациенты элитных контролеров (EC) и пациентов после лечения (PTC). Кроме того, в настоящее время предлагаются новые комплексные терапевтические стратегии для очистки резервуаров ВИЧ, но пока ни одна из них не достигла этой цели.
Поэтому цель поиска лекарства от ВИЧ [4] требует, прежде всего, лучшего понимания основных механизмов персистенции резервуаров ВИЧ в популяции хронически инфицированных полностью подавленных ВИЧ-инфицированных пациентов, чтобы определить будущие терапевтические стратегии.
Обзор исследования
Подробное описание
Чрезвычайно низкие уровни резервуаров ВИЧ достигаются у некоторых хронически инфицированных пациентов, длительно контролируемых с помощью КАРТ. Несмотря на множество и гетерогенность факторов, определяющих персистенцию резервуаров ВИЧ, такие низкие уровни резервуаров ВИЧ кажутся необходимыми, хотя, вероятно, недостаточными для достижения состояния функционального излечения, определяемого контролем вируса при отсутствии лечения. Механизмы, связанные с этими низкими резервуарами ВИЧ при хронической леченной инфекции, неизвестны, но могут включать низкую иммунную активацию и воспалительную среду, а также вредные мутации ВИЧ. Понимание этих механизмов даст новые подсказки для будущих стратегий, направленных на получение лекарства от ВИЧ.
Основная цель исследования RESACHRON состоит в том, чтобы определить у хронически инфицированных пациентов с подавленной виремией, КАРТ и крайне низкими уровнями резервуаров ВИЧ вирусные и клеточные механизмы, лежащие в основе персистенции, размера и распределения этих резервуаров ВИЧ среди различных CD4 Т-клеток. - субпопуляции с помощью всестороннего анализа с использованием инновационных высоко миниатюризированных и дополнительных иммунологических и вирусологических анализов.
Наша первая гипотеза заключается в том, что резервуары ВИЧ сохраняются даже у пациентов с низким или неопределяемым уровнем ДНК ВИЧ в общем числе РВМС и могут быть обнаружены ex vivo или вызывать продукцию ВИЧ в некоторых подмножествах CD4 Т-клеток из-за среднего 10-кратного обогащения в клетки ТКМ и ТТМ периферической крови. Таким образом, сортировка различных отсортированных CD4 TN, TCM, TTM, TEM и других ключевых подмножеств позволит проверить, есть ли и в каком подмножестве:
- геном вируса не поврежден или содержит делеции, препятствующие его репликативной способности,
- Выработку ВИЧ можно индуцировать in vitro после отчетливых сигналов активации,
- Транскрипты ВИЧ обнаруживаются ex vivo,
- Низкая иммунная активация и воспалительная среда связаны с этими чрезвычайно низкими уровнями резервуаров ВИЧ путем тестирования ряда провоспалительных молекул плазмы вместе с маркерами активации клеточной поверхности и внутриклеточными транскрипционными сигнатурами.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Paris, Франция, 75013
- Groupe Hospitalier Pitié-Salpêtrière - Service des Maladies Infectieuses et Tropicales
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- ВИЧ-1 инфицированный взрослый
- Возраст > 18 лет
- Вирусная нагрузка РНК ВИЧ в плазме (pVL) < 50 копий/мл
- На фоне антиретровирусной терапии (кАРТ)
- CD4 >400/мм3
- ДНК ВИЧ <200 копий/106 РВМС
- Возможность дать информированное согласие
Критерий исключения:
- кАРТ, начатая во время первичной инфекции
- Хронический гепатит В (HBs+антиген)
- Хронический гепатит С определяется как положительная РНК ВГС
- История химиотерапии / лучевой терапии или иммуносупрессивной терапии в течение 5 лет до включения в исследование.
- Любая история аутоиммунного заболевания
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
измерение резервуаров ВИЧ в выбранной популяции хронически инфицированных ВИЧ, получающих АРВ-препараты, оцениваемое по распределению ДНК ВИЧ в РВМС, общему количеству и субпопуляциям отсортированных Т-лимфоцитов CD4.
Временное ограничение: один год
|
Эксперименты по сортировке клеток позволят сортировать различные подмножества клеток-резервуаров CD4 и их количественную оценку для изучения характеристик резервуаров ВИЧ. Мы будем сортировать покоящиеся Т-клетки CD4, определенные как CD3+CD4+CD69-CD25-HLA-DR-, на проточном цитометре с 5 лазерами в нашем центре L3 (платформа UPMC CyPS) по крайней мере в 4 подмножествах:
|
один год
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
измерение молекулярных сигнатур хозяина и транскрипционной активности в каждом подмножестве, оцененное с помощью микрофлюидной qRT-PCR (Fluidigm)
Временное ограничение: один год
|
молекулярные сигнатуры хозяина и транскрипционная активность, полученные с помощью микрофлюидной qRT-PCR (Fluidigm) с количественным определением ключевых генов хозяина среди панели из 90 молекулярных сигнатур хозяина, включая факторы, участвующие в рестрикции, подавлении или активации транскрипции ВИЧ
|
один год
|
|
мера in vitro индуцируемости провируса ВИЧ в различных отсортированных субпопуляциях CD4, содержащих резервуары ВИЧ, оцениваемая с помощью сверхчувствительного анализа ОТ-ПЦР в реальном времени
Временное ограничение: один год
|
Индукция репликативно-компетентных форм ВИЧ, измеренная в супернатантах культур из каждой подгруппы с использованием сверхчувствительного анализа ОТ-ПЦР в реальном времени.
|
один год
|
|
мера дефектной вирусной популяции, определяемая долей стоп-кодонов в интегрированной ДНК ВИЧ, оцениваемой с помощью сверхглубокого секвенирования и
Временное ограничение: один год
|
ex vivo молекулярные характеристики филогенетический анализ интегрированной ДНК ВИЧ в геноме отсортированных подмножеств CD4 хозяина
|
один год
|
|
измерение уровней несплайсированных транскриптов ВИЧ в целом и различных субпопуляциях Т-клеток CD4.
Временное ограничение: один год
|
Уровни несплайсированных транскриптов ВИЧ, полученные с помощью микрофлюидной qRT-PCR (Fluidigm)
|
один год
|
|
измерение сывороточных воспалительных биомаркеров, оцененных с помощью анализа ELISA
Временное ограничение: один год
|
Анализ биомаркеров воспаления в плазме: hsCRP, IL6, sTNF I, IP-10, sCD14, sCD63 и D-димеры
|
один год
|
|
мера иммунной активации в различных подмножествах отсортированных CD4 Т-клеток, оцениваемая с помощью проточной цитометрии на свежей крови
Временное ограничение: один год
|
• Маркеры активации клеточного иммунитета проанализированы методом проточной цитометрии на свежей крови.
Маркеры активации будут проанализированы на субпопуляциях CD4 (HLA-DR) и CD8 (HLA-DR, CD38) (т.е. N, TCM, TTM, TEM) и на субпопуляциях моноцитов, определяемых экспрессией CD14/CD16 (CD163/CD38).
Экспрессия CD38 будет количественно оцениваться с помощью шариков.
|
один год
|
Соавторы и исследователи
Следователи
- Директор по исследованиям: Christine Katlama, MD, Groupe Hospitalier Pitie-Salpetriere
- Главный следователь: Ruxandra Calin, MD, Groupe Hospitalier Pitie-Salpetriere
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оценивать)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Другие идентификационные номера исследования
- CREPATS 002
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .