Тестирование инновационного биомаркера: экспрессия HIF-1α и его изоформ в крови и кожных тканях при обширных ожогах (HIF)

Ожоговые травмы с полнослойным поражением кожи, охватывающие большие площади поверхности тела, могут вызывать локальные и системные нарушения, которые дорого обходятся человеческим страданиям, а также создают нагрузку на систему здравоохранения. Характеристика новых основных молекулярных биомаркеров, участвующих в этом процессе, создает серьезные диагностические и терапевтические проблемы.

Индуцируемый гипоксией фактор-1α (HIF-1α) представляет собой повсеместно экспрессируемый гетеродимерный фактор транскрипции, содержащий субъединицы α и β. Показано, что в нормоксических условиях субъединица HIF-1α убиквитинируется и деградирует, тогда как в условиях гипоксии HIF-1α накапливается, димеризуется с HIF-1β и активирует транскрипцию ряда генов-мишеней, кодирующих множественные ангиогенные факторы роста и цитокины, имеющие потенциальное значение для заживления ран. Было идентифицировано семь изоформ HIF-1α, полученных в результате альтернативного сплайсинга.

Несколько исследований показали важность HIF-1α в заживлении ран на животных моделях. Действительно, сниженные уровни и активность HIF-1 были зарегистрированы в условиях нарушенного заживления ран. Обзор литературы показывает заметное снижение уровня HIF-1α у мышей в случае ожоговой раны кожи, чем в случае эксцизионной кожной раны. Другие исследования показали, что экспрессия HIF-1α коррелирует со степенью и глубиной ожогов.

Это исследование направлено на улучшение знаний о патофизиологических факторах, связанных с заживлением ран. Предположения основаны на результатах исследований, проведенных на мышах, и эта работа направлена ​​на документирование этих результатов на людях.

Цель

Основная цель исследования — сравнить вариации экспрессии HIF-1α, измеренные в образцах крови и тканей кожи, в трех группах:

• Субъекты с обширными ожоговыми ранами, занимающими более 20% общей площади поверхности тела;
• Субъекты с ожоговыми ранами менее 5% от общей площади поверхности тела;
• Субъекты с кожной раной после хирургической процедуры, требующей резекции кожи.

Вторичные цели заключаются в том, чтобы сравнить уровни экспрессии HIF-1α локально в месте ожога с уровнями, наблюдаемыми в крови, оценить экспрессию факторов роста, продуцируемых генами-мишенями HIF-1α (VEGF и EPO) или играющих центральную роль в заживлении. процесс (TGF-β1), а также оценить корреляцию между экспрессией HIF-1α и кинетикой заживления ран субъекта, оцененную путем оценки времени полной эпителизации донорских участков.

Материал и методы

Предлагаем создать три группы:

• 15 пострадавших с обширными ожогами 3-й степени, поразившими более 20% общей площади поверхности тела;
• 15 пациентов с менее обширными ожогами 3-й степени, занимающими менее 5% поверхности тела;
• 15 больных с послеоперационными ранами с резекцией кожи. Образцы кожи и тканей будут собираться три раза: на 0, 7 и 14 день у пациентов с ожогами (с более чем 20% общей площади поверхности тела и менее 5% площади поверхности тела). Образцы кожной ткани будут собираться при резекции кожи у пациентов с послеоперационными ранами на 0-й день, образцы крови будут собираться на 0-й и 14-й день.