Трансплантация островков с использованием PKX-001

Фон

Клиническая трансплантация островковых клеток в настоящее время является общепринятым методом лечения отдельных пациентов с диабетом с частыми эпизодами гипогликемии и тяжелой гликемической предрасположенностью. Хотя результаты трансплантации островковых клеток значительно улучшились в узкоспециализированных центрах с показателем 5-летней независимости от инсулина, превышающим 50%, часть пациентов позже нуждаются в повторном введении инсулина. Tac может быть частично ответственен за ограниченную долговечность островков и потребность в нескольких донорах для каждого реципиента, несмотря на его способность предотвращать отторжение и аутоиммунный рецидив. Исследования in vitro островков, подвергшихся воздействию иммунодепрессантов, показали, что уровни Tac выше 10-100 мг/л вызывают вакуолизацию и разрушение островков в культуре.

Белки-антифризы (AFP) вызвали значительный интерес из-за их способности защищать клетки в различных условиях. Однако их большой размер ограничивает их использование в медицине, поскольку они не могут проходить через капилляры в интерстициальную ткань и не могут достигать клеток-мишеней.

Имея в виду эти недостатки АФП, доктор Жеральдин-Кастелот-Дельенкур (Руан, Франция) изобрел антивозрастной гликопептид, который позже производится компанией ProtoKinetix Inc. (Санкт-Петербург). Мэрис, Западная Виргиния, США). Антивозрастной гликопептид ProtoKinetix, PKX-001, представляет собой небольшую стабильную синтетическую копию более крупного и менее стабильного АФП.

PKX-001 прошел серию испытаний в различных внешних лабораториях в Европе и Северной Америке. Эти тесты доказали его способность защищать множество клеточных линий (клетки Hela, взрослые фибробласты, неонатальные фибробласты, стволовые клетки нейронов человека, стволовые клетки нейронов мыши, островковые клетки мыши, тромбоциты, кластер дифференцировки 34+ (CD34+) клетки, и кератиноциты) от ультрафиолета А (УФА), ультрафиолета С (УФС), перекиси водорода, воспаления (ИЛβ), времени, температуры (-196°С, -80°С, -3°С, 3°С, 4°С , 15°C и 22°C) и низкая сыворотка вызывали гибель клеток при рН от 5,3 до 10,5. В дополнение к защите выживания клеток PKX-001 также сохраняет функциональность клеток. Это было проверено с помощью маркеров стволовых клеток, тестов функциональности CD34+ и исследований in vivo, в которых было обнаружено, что трансплантированные островковые клетки, обработанные PKX-001, снижают концентрацию глюкозы в крови у мышей с диабетом на 40% к 40-му дню по сравнению с островковыми клетками, которые были трансплантированы. мышей без предварительного воздействия PKX-001.

В свете полезной роли PKX-001 в сохранении клеточной выживаемости и функциональности наша команда оценила цитопротекторную способность PKX-001 при трансплантации островков, особенно его способность защищать от диабетогенного эффекта Tac.

In vitro оценка островков человека в культуре с добавкой PKX-001 также показала повышенное качество и выход островков человека после консервации и защиту от острого воздействия Tac в клинически значимых дозах по сравнению с таковыми без добавки PKX-001. Дальнейший анализ показал, что островки, обработанные PKX-001, имели сниженный окислительный стресс, улучшенное высвобождение инсулина за счет усиления экзоцитоза островков, снижение потери островков во время сохранения из-за апоптоза даже в присутствии Tac.

Исследования in vivo дополнили все вышеуказанные результаты in vitro, которые продемонстрировали, что добавка PKX-001 подавляла раннее воспаление и улучшала приживление островковых клеток с долгосрочной эффективностью.

Предлагаемое исследование представляет собой нерандомизированное открытое проспективное исследование I фазы с использованием ретроспективного контроля.

В этом исследовании будут участвовать десять взрослых кандидатов на трансплантацию островковых клеток (18 лет и старше), которые считаются подходящими для стандартной трансплантации островковых клеток в больнице Университета Альберты.

Ретроспективные данные 10 пациентов с трансплантатами островковых клеток, согласившихся на рассмотрение карт (Протокол №: 000001120, озаглавленный: «Постоянный обзор пациентов с трансплантированными островками в Университете Альберты» и Протокол №: 000001122, озаглавленный: «Совместный реестр трансплантатов островковых клеток»), также будут собрал.

Стандарт управления уходом будет определен из базы данных программы Islet Transplant (период: 2014–2016 гг.) и анонимизирован с помощью простой системы нумерации.

Гипотеза:

Трансплантация островков, обработанных PKX-001, безопасна и улучшает результаты трансплантации.

Основная цель:

Чтобы продемонстрировать безопасность трансплантации островков, обработанных PKX-001.

Второстепенные цели:

Для оценки эффективности трансплантации островков, обработанных PKX-001. Для оценки эффективности добавления PKX-001 во время сохранения островков.

Процедуры:

Перед трансплантацией пациент проходит скрининг, квалификацию, вносится в список для трансплантации и подписывает форму информированного согласия.

Когда подходящий препарат островков станет доступным, пациент получит аллогенные островковые клетки, трансплантированные пациентам интрапортально чрескожным чреспеченочным доступом.

Трансплантация островковых клеток будет проводиться в соответствии с текущим режимом иммуносупрессии, включая индукцию (алемтузумаб/базиликсимаб) и длительную иммуносупрессию (програф/целлсепт). Схема приживления включает противовоспалительные препараты (этанерцепт/анакинра) и внутривенное введение инсулина и гепарина. Единственным дополнительным вмешательством, использованным в этом пилотном испытании, является добавление исследуемого агента PKX-001 к процессингу островков.

Следовать за:

Участники пройдут 3-месячный период наблюдения после их первоначальной или последующей трансплантации островков.

Для этого исследования не требуются последующие визиты для конкретного исследования. Субъекты исследования будут сопровождаться в соответствии со стандартом медицинской помощи. В целях оценки первичных и вторичных конечных точек следующие измерения, собранные у испытуемых в моменты времени, указанные в соответствии со стандартом лечения, будут рассмотрены и записаны в диаграмму до 30-го дня после трансплантации:

Клиническая оценка специалистом по трансплантации или персоналом; Анализ крови после трансплантации (в соответствии со Стандартом медицинской помощи); Метаболическое тестирование: Убедитесь (или Аргинин); Записи уровня глюкозы для самоконтроля. Случаи первичной нефункциональности (см. определение в Глоссарии); О случаях нежелательных явлений или серьезных нежелательных явлений можно сообщать в любой день после трансплантации; УЗИ брюшной полости с допплерографией (клинически значимые данные). Исследование будет оставаться открытым для сбора данных о последующем наблюдении всех 10 реципиентов в течение 3 месяцев после трансплантации. Отчеты о первичных и вторичных результатах будут поступать через 90 дней после трансплантации последнего пациента в исследование.