Эффект гидрогеля PAE, нагруженного tRF-ASO-Exo, у пациентов с диабетическими заболеваниями глазной поверхности

Сахарный диабет – широко распространённое хроническое системное метаболическое расстройство, поражающее население по всему миру. Согласно последним данным Международной диабетической федерации (IDF), глобальная распространённость диабета среди взрослых составляет 10,5%, тогда как в Китае она достигает 11,6%, что соответствует примерно 113,9 миллионам поражённых взрослых – самому высокому абсолютному числу в мире. Системные и глазные осложнения, связанные с диабетом, значительно ухудшают качество жизни пациентов и налагают существенное экономическое бремя на отдельных лиц, семьи и системы здравоохранения, тем самым представляя собой актуальную проблему общественного здравоохранения, требующую скоординированных действий на национальном и международном уровнях. Диабетическая болезнь глазной поверхности (DOSD) представляет собой одно из самых ранних и наиболее часто наблюдаемых глазных осложнений диабета, часто предшествуя другим глазным проявлениям диабета. Её заболеваемость заметно возрастает с увеличением продолжительности болезни и неоптимальным гликемическим контролем. Примечательно, что пациенты с диабетом, подвергающиеся распространённым офтальмологическим процедурам – включая факоэмульсификацию при катаракте, удаление птеригиума и витреоретинальную хирургию – подвержены повышенному риску послеоперационных кератоконъюнктивальных расстройств, которые могут прогрессировать до необратимого нарушения зрения или слепоты, тем самым угрожая долгосрочной целостности глаза. Среди лиц с диабетом продолжительностью ≥5 лет более 60% развивают умеренно-тяжёлый синдром сухого глаза или кератоконъюнктивальное повреждение эпителия, клинически характеризующееся прогрессирующими симптомами, включая сухость глаз, ощущение инородного тела, светобоязнь, боль и, в запущенных случаях, потерю зрения, – что в совокупности приводит к заметному ухудшению функционального состояния и качества жизни.

Текущее клиническое ведение DOSD остаётся в основном паллиативным, опираясь преимущественно на замещение искусственной слезой, секретагоги и местные противовоспалительные средства. Однако эти вмешательства не устраняют лежащую в основе нейроэпителиальную дисфункцию и ограничены низкой долгосрочной приверженностью – заявленные показатели составляют менее 50% – что приводит к неоптимальным терапевтическим результатам. Следовательно, разработка механизм-ориентированных, модифицирующих течение болезни методов лечения DOSD является острой неудовлетворённой клинической потребностью.

Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) – это синтетические одноцепочечные молекулы РНК, разработанные для связывания комплементарных фрагментов, полученных из тРНК (tRF), с высокой специфичностью, тем самым ингибируя их патогенную активность. Терапевтические средства на основе ASO продемонстрировали устойчивую эффективность при нейродегенеративных расстройствах, причём несколько кандидатов продвинулись до поздних стадий клинических испытаний. Инженерные экзосомы представляют собой платформу доставки лекарств следующего поколения, предлагая увеличенную ёмкость для загрузки нуклеиновых кислот, улучшенную фармакокинетическую стабильность, повышенную биодоступность и превосходное тканевое нацеливание по сравнению с обычными экзосомами или свободными низкомолекулярными лекарствами. В офтальмологии масштабируемое производство инженерных экзосом открыло новые возможности для локального лечения кератоконъюнктивальных заболеваний. Более того, гидрогели обеспечивают физическую инкапсуляцию терапевтических средств на основе нуклеиновых кислот, защищая их от быстрой ферментативной деградации in vivo; в сочетании с внутренним липидным бислоем экзосом это создаёт синергетическую систему защиты с «двойным барьером», которая заметно повышает терапевтическую долговечность и клиническую трансляционность. Гидрогели поли(β-аминоэфира) (PAE) – изготовленные как биосовместимые трёхмерные каркасы – сохраняют благоприятные свойства обычных гидрогелей, одновременно обеспечивая пролонгированное контролируемое высвобождение, масштабируемое производство и внутренний потенциал нейрорегенерации. В доклинических исследованиях на мышиной модели диабетической болезни глазной поверхности местное применение гидрогеля PAE, загруженного инженерными экзосомами, полученными из мезенхимальных стволовых клеток, нацеленными на tRF (tRF-ASO-Exo), значительно ослабляло воспаление глазной поверхности, способствовало структурному восстановлению роговичного и конъюнктивального эпителия и сохраняло жизнеспособность роговичного эпителия.

Данное исследование направлено на оценку новой неинвазивной местной гидрогелевой системы доставки экзосом, полученных из мезенхимальных стволовых клеток и загруженных tRF-ASO (MSC-Exos), у пациентов с DOSD. Основная цель – оценить структурное и функциональное восстановление глазной поверхности с использованием мультимодальной визуализации и клинических показателей: оптической когерентной томографии переднего отрезка (AS-OCT), конфокальной микроскопии in vivo (IVCM), окрашивания роговицы флуоресцеином под контролем щелевой лампы и количественного тестирования чувствительности роговицы. Улучшение симптомов будет оцениваться с помощью валидированного Индекса болезни глазной поверхности (OSDI). Вторичные конечные точки включают объём слезоотделения (тест Ширмера), время разрыва слёзной плёнки (TBUT), градацию покраснения глаз, высоту слёзного мениска (посредством AS-OCT) и наилучшую скорректированную остроту зрения (BCVA).

Всего будет включено 30 участников, рандомизированных в три группы вмешательства. После 14-дневного периода введения плацебо – в течение которого все субъекты получают двусторонние глазные капли плацебо (по одной капле в каждый глаз два раза в день с интервалом примерно 12 часов) – участники будут получать активное лечение в течение 84 дней: Группа 1 (Exo) получает 10 мкг/каплю немодифицированных MSC-Exos; Группа 2 (tRF-ASO-Exo) получает 10 мкг/каплю MSC-Exos, сформулированных в гидрогеле PAE; и Группа 3 (tRF-ASO-Exo-PAE) получает 10 мкг/каплю инженерных MSC-Exos tRF-ASO, доставляемых через гидрогель PAE – все вводится два раза в день. Будет проведено 12-недельное наблюдение для мониторинга прогрессирования болезни и долговечности терапевтических эффектов.