Фаза 1 исследования геля LUT017 для оценки безопасности и заживления ран у взрослых с венозными трофическими язвами и хроническими незаживающими ранами кожи

Обзор исследования и клинический контекст

Это клиническое исследование фазы 1 с открытой меткой и повышением дозы, предназначенное для оценки безопасности, переносимости, фармакокинетики и предварительной биологической активности геля LUT017 при местном применении у пациентов с венозными язвами голени (ВЯГ) и другими хроническими незаживающими кожными ранами. Исследование представляет собой первое клиническое изучение LUT017 в условиях нарушения заживления кожных ран и предназначено для установления первоначального профиля безопасности, характеристики системной экспозиции после местного применения и определения выбора дозы для будущих контролируемых исследований.

Венозные язвы голени представляют собой наиболее выраженное клиническое проявление хронической венозной недостаточности и возникают вследствие стойкой венозной гипертензии, микроциркуляторной дисфункции, захвата лейкоцитов и хронического воспалительного сигналинга в нижних конечностях. Возникающая раневая среда характеризуется постоянной активацией цитокинов, чрезмерной активностью матриксных металлопротеиназ, нарушенной реактивностью фибробластов и кератиноцитов, окислительным стрессом и измененным обновлением внеклеточного матрикса. Эти процессы приводят к замедленной эпителиальной миграции, нарушенной реэпителизации и пролонгированной хроничности раны. Несмотря на оптимизированную компрессионную терапию и местное ведение раны, значительная доля ВЯГ не заживает в клинически приемлемые сроки. В настоящее время не существует одобренных фармакологических средств, специально разработанных для активации регенеративных сигнальных путей в хронических раневых ложах.

Терапевтическая гипотеза, лежащая в основе данного исследования, заключается в том, что локальная активация эпидермальных регенеративных путей может восстановить пролиферативную и миграционную способность в хронических ранах без индукции системной токсичности. LUT017 был разработан для достижения этой цели посредством парадоксальной активации пути митоген-активируемых протеинкиназ (MAPK) в кератиноцитах с диким типом BRAF.

Механистическое обоснование

LUT017 представляет собой низкомолекулярный ингибитор BRAF. Хотя ингибиторы BRAF изначально разрабатывались для подавления онкогенных мутаций BRAF V600 в меланоме, было продемонстрировано, что в клетках, экспрессирующих дикий тип BRAF, особенно при наличии активности вышестоящего RAS, ингибирование BRAF может вызывать парадоксальную активацию нижестоящего MAPK-сигналинга. Этот эффект происходит за счет димеризации RAF и трансактивации CRAF, приводя к усилению фосфорилирования ERK. В эпидермальных кератиноцитах активация ERK способствует клеточной пролиферации, реорганизации цитоскелета, миграции в раневое ложе и восстановлению целостности эпителиального барьера.

Доклинические исследования заживления ран, проведенные на мышиных моделях диабетических и эксцизионных ран, продемонстрировали ускоренное закрытие ран после местного применения аналога ингибитора BRAF, близкого к LUT017. Гистологическая оценка выявила увеличенное количество фосфорилированных ERK-положительных и Ki67-положительных кератиноцитов на краях ран, более раннее начало реэпителизации и усиленную миграцию эпителиального языка. Дополнительные молекулярные анализы продемонстрировали активацию сигналинга Wnt/β-катенина и индукцию фолликулярного неогенеза в раневых ложах, что позволяет предположить, что парадоксальная активация MAPK может индуцировать регенеративный фенотип, а не просто гиперпролиферацию.

Важно отметить, что в двухстадийных моделях канцерогенеза кожи местное воздействие регенеративных доз ингибиторов BRAF не увеличивало образование папиллом или частоту плоскоклеточного рака, подтверждая безопасность локальной активации MAPK в условиях контролируемого местного воздействия.

Исследуемый продукт

LUT017 представляет собой неодобренный исследуемый ингибитор BRAF с молекулярной массой 546,94 дальтон и молекулярной формулой C27H18ClF3N8. Соединение было оптимизировано для местного применения и сформулировано в виде водного геля, предназначенного для обеспечения дермального проникновения при минимальной системной абсорбции. Формуляция содержит полиэтиленгликоль 400, Транскутерол HP, 2-пропанол, диизопропиладипат, бензиловый спирт, полимер Карбопол 980 NF, гидроксид натрия и очищенную воду. Гель имеет слегка вязкую консистенцию, диапазон pH примерно от 5 до 7 и поставляется в тубах по 50 грамм для контролируемого клинического использования. Продукт хранится при контролируемой комнатной температуре и защищен от света.

Стратегия формуляции была разработана для баланса эпидермального проникновения и локальной фармакодинамической активности при ограничении системной экспозиции, тем самым снижая риск класс-ассоциированных системных токсичностей, наблюдаемых при пероральном применении ингибиторов BRAF.

Доклиническая безопасность и токсикология

LUT017 прошел комплексную программу доклинической оценки, включая дермальную токсичность, системную токсикологию, генотоксичность, фототоксичность, оценку раздражения глаз и сердечно-сосудистой безопасности. Исследования повторной дозовой дермальной токсичности, проведенные на моделях грызунов и мини-свиней продолжительностью до 56 дней, не продемонстрировали признаков системной органной токсичности, клинически значимых аномалий ЭКГ и стойких лабораторных отклонений. Гистопатологическое исследование не выявило связанного с лечением повреждения органов при дозах, существенно превышающих прогнозируемые уровни клинической экспозиции. Уровень без наблюдаемых неблагоприятных эффектов (NOAEL) для дермального введения был установлен на уровне 5 мг/кг/день у обоих видов.

Исследования повторной пероральной дозы продемонстрировали дозозависимые, но обратимые лабораторные изменения при высоких системных экспозициях, с NOAEL 25 мг/кг/день у самок животных. Эти экспозиции превышают те, которые ожидаются после местного применения у людей.

Тестирование на генотоксичность дало отрицательные результаты в бактериальных тестах обратной мутации, in vitro тестах на микроядра, in vivo исследованиях микроядер и в комет-анализе. Тестирование на фототоксичность in vitro и in vivo не продемонстрировало фотореактивного потенциала при клинически релевантных концентрациях. Исследования сердечно-сосудистой безопасности на собаках породы бигль и мини-свиньях с телеметрическим мониторингом не показали клинически значимого удлинения QT или аритмогенного сигнала.

В совокупности эти данные поддерживают начало клинической оценки с соответствующим мониторингом и консервативным повышением дозы.

Дизайн исследования

В данном исследовании используется традиционный дизайн повышения дозы 3+3 в трех последовательных когортах местной концентрации геля LUT017: 0,03%, 0,1% и 0,25%. От двенадцати до восемнадцати участников будут включены в исследование в зависимости от частоты дозолимитирующих токсичностей. Решения о повышении дозы будут основываться на возникновении нежелательных явлений, связанных с лечением, соответствующих предопределенным критериям дозолимитирующей токсичности в течение четырех недель после первого введения. Максимально переносимая доза определяется как самый высокий уровень дозы, при котором не более одного из шести участников испытывает дозолимитирующую токсичность.

Включение в каждую когорту будет проводиться ступенчато, чтобы обеспечить адекватную оценку безопасности перед введением дозы последующим участникам. Внутрисубъектное повышение или модификация дозы не допускается.

Периоды исследования

Исследование состоит из четырех последовательных фаз. В течение скринингового периода, который может длиться до 28 дней, участники проходят базовые оценки, включая физикальное обследование, лабораторные тесты, электрокардиографию, офтальмологическую оценку и документирование раны.

После скрининга участники вступают в 14-дневный период подготовки, в течение которого проводится стандартизированная компрессионная терапия и оптимизированный уход за раной. Эта подготовительная фаза служит для подтверждения хроничности раны в условиях контролируемого ведения и исключения язв, демонстрирующих существенное заживление только при стандартной терапии.

Подходящие участники затем переходят к фазе лечения, в течение которой гель LUT017 наносится один раз в неделю непосредственно на целевую рану в течение до восьми недель или до полной реэпителизации. Применение препарата проводится в клинике квалифицированными исследователями для обеспечения стандартизированного введения и соблюдения протокола.

После завершения лечения участники вступают в расширенную фазу наблюдения с визитами через три и шесть месяцев после первой дозы для оценки устойчивости раневого ответа и мониторинга отсроченных нежелательных явлений. Общее участие субъекта составляет приблизительно шесть с половиной месяцев.

Мониторинг безопасности

Оценка безопасности является основной целью данного исследования. Участники проходят серийные физикальные обследования, оценку жизненных показателей, лабораторные оценки, включая общий анализ крови и комплексную метаболическую панель, электрокардиограммы и системный мониторинг нежелательных явлений на протяжении периодов лечения и наблюдения. Нежелательные явления градуируются с использованием стандартных критериев токсичности и оцениваются на связь с исследуемым препаратом.

Учитывая известные классовые эффекты системных ингибиторов BRAF, акцент делается на дерматологическом мониторинге. Исследователи оценивают развитие кератоакантом, кожного плоскоклеточного рака, плоскоклеточных папиллом, фотосенситивных реакций, высыпаний по типу узловатой эритемы, фолликулита, образования кист и других пролиферативных кожных поражений. Подозрительные поражения оцениваются и ведут в соответствии со стандартной клинической практикой.

Предопределенные правила остановки требуют временного приостановления исследования при достижении порогов тяжелой или неожиданной токсичности, включая связанную с лечением смерть или множественные нежелательные явления 4 степени, приписываемые исследуемому препарату.

Фармакокинетическая оценка

Для характеристики системной экспозиции после местного применения проводится забор плазмы для фармакокинетического анализа в предопределенные временные точки, включая преддозовый и через один час после дозы на День 0, а также преддозовый забор на Дни 7, 14, 21 и 28. Эти данные позволят оценить пиковую концентрацию, минимальные уровни и кумуляцию, а также подтвердят, остается ли системная экспозиция минимальной, как ожидалось на основе доклинического моделирования.

Статистические соображения

Данное исследование ранней фазы не имеет достаточной мощности для подтверждающего тестирования эффективности. Данные по безопасности будут суммированы описательно. Параметры заживления ран, включая уменьшение площади раны и показатели полной реэпителизации, будут анализироваться описательно и могут быть исследованы с использованием методологий времени до события, таких как оценка Каплана-Мейера. Формальное тестирование гипотез не планируется.

Соображения риск-польза

Потенциальные риски местного применения LUT017 включают локальную кожную гиперпролиферацию, воспалительные дерматологические реакции и теоретически минимальные эффекты, связанные с системной экспозицией. Эти риски смягчаются за счет консервативного повышения дозы, ступенчатого включения, интенсивного мониторинга и предопределенных критериев остановки. Ожидаемая польза заключается в ускорении закрытия раны и восстановлении эпителиальной целостности в хронических ранах, которые не ответили на стандартную терапию.