Upptäckt av nya cirkulerande biomarkörer för koronar ateroskleros

Hypotes: Vår hypotes är att koronar ateroskleros inducerar både kvantitativa och kvalitativa modifieringar av cirkulerande proteiner, som kan fångas upp med en differentiell proteomisk metod som tillämpas på serum- eller plasmaprover. Identifiering av sådana förändringar i det cirkulerande blodet hos patienter med kranskärlssjukdom (mot patienter utan kranskärlssjukdom) och/eller patienter med akuta kranskärlssyndrom (mot stabil kranskärlssjukdom) kan leda till upptäckten av nya biomarkörer för kranskärlsförkalkning och sårbarhet för aterosklerotisk plack.

Mål:

Primärt mål: Identifiering av nya cirkulerande biomarkörer för stabil och instabil kranskärlssjukdom med hjälp av en ny metod för differentiell proteomik.

Sekundära mål:

• Utvärdering av det diagnostiska värdet av dessa nya biomarkörer för diagnos av stabil och instabil kranskärlssjukdom.
• Jämförelse av det diagnostiska värdet av dessa nya biomarkörer med det diagnostiska värdet av 1) andra validerade biomarkörer för ateroskleros (t.ex. CRP, IL-6, CD40L, markörer för leukocytaktivering, …); och 2) av icke-invasiva mätningar av artärens funktion (t.ex. tjocklek på halsartären intima-media, pulsvågshastighet, ankel/brachial index, …)
• Beskrivning av sambandet mellan dessa nya biomarkörer och allvarliga biverkningar i kranskärlen (död, hjärtinfarkt, revaskularisering) under en 12-månaders uppföljning.

Metoder:

Uniq center, prospektiv studie. Tre grupper av patienter kommer att studeras. Grupp 1: Akut hjärtinfarkt utan ST-förhöjning; Grupp 2: Stabil kranskärlssjukdom; Grupp 3: normala kranskärl och frånvaro av andra detekterbara aterosklerotiska lesioner.

Ett nytt proteomiskt tillvägagångssätt kommer att tillämpas på serum- och plasmaprover erhållna 1 månad efter sjukhusvistelsen. Detta tillvägagångssätt inkluderar 3 steg: 1) utjämning av cirkulerande proteiner (exponera lågkoncentrationsproteiner som tillhör "djupproteomet"); 2) Retentionskromatografi; och 3) proteinseparation med användning av 2D-elektrofores och ytförbättrad laserdesorption/joniseringstid-flight (SELDI-TOF).

Biomarkörer med det högsta diagnostiska värdet kommer därefter att identifieras med hjälp av Matrix-Assisted Laser Desorbtion/Jonisation Time-of-Flight (MALDI-TOF) och tandemmasspektrometri (MS/MS).

Perspektiv:

Validering av de diagnostiska och prognostiska värdena för de nya biomarkörerna som upptäckts och identifierats med den proteomiska metoden som beskrivs ovan kommer att kräva utveckling av enklare mättekniker (t.ex. ELISA), som kommer att användas prospektivt eller retrospektivt i andra kohorter av patienter med kranskärlssjukdom . Grundläggande studier kommer att utföras parallellt, för att bättre förstå vilken roll dessa nya biomarkörer spelar i patofysiologin av ateroskleros.