Descubrimiento de nuevos biomarcadores circulantes de aterosclerosis coronaria

Hipótesis: Nuestra hipótesis es que la aterosclerosis coronaria induce modificaciones cuantitativas y cualitativas de las proteínas circulantes, que pueden ser capturadas por un enfoque proteómico diferencial aplicado a muestras de suero o plasma. La identificación de dichas modificaciones en la sangre circulante de pacientes con enfermedad de las arterias coronarias (frente a pacientes sin enfermedad de las arterias coronarias) y/o de pacientes con síndromes coronarios agudos (frente a enfermedades de las arterias coronarias estables) puede conducir al descubrimiento de nuevos biomarcadores de aterosclerosis coronaria y de Vulnerabilidad de la placa aterosclerótica.

Objetivos:

Objetivo principal: Identificación de nuevos biomarcadores circulantes de enfermedad arterial coronaria estable e inestable utilizando un nuevo enfoque de proteómica diferencial.

Objetivos secundarios:

• Evaluación del valor diagnóstico de estos nuevos biomarcadores para el diagnóstico de enfermedad arterial coronaria estable e inestable.
• Comparación del valor diagnóstico de estos nuevos biomarcadores con el valor diagnóstico de 1) otros biomarcadores validados de aterosclerosis (p. ej., CRP, IL-6, CD40L, marcadores de activación de leucocitos,...); y 2) de medidas no invasivas de la función arterial (p. ej., grosor íntima-media de la arteria carótida, velocidad de la onda del pulso, índice tobillo/brazo, …)
• Descripción de la relación entre estos nuevos biomarcadores y eventos coronarios adversos mayores (muerte, infarto de miocardio, revascularización) durante un seguimiento de 12 meses.

Métodos:

Centro Uniq, estudio prospectivo. Se estudiarán tres grupos de pacientes. Grupo 1: infarto agudo de miocardio sin elevación del segmento ST; Grupo 2: enfermedad arterial coronaria estable; Grupo 3: arterias coronarias normales y ausencia de otras lesiones ateroscleróticas detectables.

Se aplicará un nuevo enfoque proteómico a las muestras de suero y plasma obtenidas 1 mes después de la hospitalización índice. Este enfoque incluye 3 pasos: 1) ecualización de las proteínas circulantes (exponer proteínas de baja concentración que pertenecen al "proteoma profundo"); 2) cromatografía de retención; y 3) separación de proteínas mediante electroforesis 2D y tiempo de vuelo de desorción/ionización láser mejorado en superficie (SELDI-TOF).

Los biomarcadores con el valor de diagnóstico más alto se identificarán posteriormente mediante el tiempo de vuelo de ionización/desorción láser asistida por matriz (MALDI-TOF) y la espectrometría de masas en tándem (MS/MS).

Perspectivas:

La validación de los valores de diagnóstico y pronóstico de los nuevos biomarcadores descubiertos e identificados utilizando el enfoque proteómico descrito anteriormente requerirá el desarrollo de técnicas de medición más sencillas (p. ej., ELISA), que se utilizarán de forma prospectiva o retrospectiva en otras cohortes de pacientes con enfermedad de las arterias coronarias. . En paralelo, se realizarán estudios básicos para comprender mejor el papel de estos nuevos biomarcadores en la fisiopatología de la aterosclerosis.