Oppdagelse av nye sirkulerende biomarkører for koronar aterosklerose

Hypotese: Vår hypotese er at koronar aterosklerose induserer både kvantitative og kvalitative modifikasjoner av sirkulerende proteiner, som kan fanges opp av en differensiell proteomisk tilnærming brukt på serum- eller plasmaprøver. Identifisering av slike modifikasjoner i det sirkulerende blodet til pasienter med koronararteriesykdom (versus pasienter uten koronararteriesykdom) og/eller pasienter med akutte koronarsyndromer (versus stabil koronararteriesykdom) kan føre til oppdagelse av nye biomarkører for koronar aterosklerose og aterosklerotisk plakk sårbarhet.

Mål:

Primært mål: Identifisering av nye sirkulerende biomarkører for stabil og ustabil koronararteriesykdom ved bruk av en ny tilnærming til differensiell proteomikk.

Sekundære mål:

• Evaluering av den diagnostiske verdien av disse nye biomarkørene for diagnostisering av stabil og ustabil koronararteriesykdom.
• Sammenligning av den diagnostiske verdien av disse nye biomarkørene med den diagnostiske verdien av 1) andre validerte biomarkører for aterosklerose (f.eks. CRP, IL-6, CD40L, markører for leukocyttaktivering, …); og 2) av ikke-invasive målinger av arteriell funksjon (f.eks. carotisarterie intima-media tykkelse, pulsbølgehastighet, ankel/brachial indeks, …)
• Beskrivelse av forholdet mellom disse nye biomarkørene og alvorlige uønskede koronare hendelser (død, hjerteinfarkt, revaskularisering) i løpet av en 12-måneders oppfølging.

Metoder:

Uniq-senter, prospektiv studie. Tre grupper pasienter vil bli studert. Gruppe 1: Akutt hjerteinfarkt uten ST-elevasjon; Gruppe 2: Stabil koronararteriesykdom; Gruppe 3: normale koronararterier og fravær av andre påvisbare aterosklerotiske lesjoner.

En ny proteomisk tilnærming vil bli brukt på serum- og plasmaprøver tatt 1 måned etter indeksinnleggelsen. Denne tilnærmingen inkluderer 3 trinn: 1) utjevning av sirkulerende proteiner (eksponer lavkonsentrasjonsproteiner som tilhører "dypproteomet"); 2) retensjonskromatografi; og 3) proteinseparasjon ved bruk av 2D-elektroforese og overflateforbedret laserdesorpsjon/ioniseringstidspunkt (SELDI-TOF).

Biomarkører med høyest diagnostisk verdi vil deretter bli identifisert ved hjelp av Matrix-Assisted Laser Desorbtion/Ionization Time-of-Flight (MALDI-TOF) og tandem massespektrometri (MS/MS).

Perspektiver:

Validering av de diagnostiske og prognostiske verdiene til de nye biomarkørene som er oppdaget og identifisert ved bruk av den proteomiske tilnærmingen beskrevet ovenfor, vil kreve utvikling av mer enkle måleteknikker (f.eks. ELISA), som vil bli brukt prospektivt eller retrospektivt i andre kohorter av pasienter med koronararteriesykdom . Grunnleggende studier vil bli utført parallelt, for å bedre forstå rollen til disse nye biomarkørene i patofysiologien til aterosklerose.