Открытие новых циркулирующих биомаркеров коронарного атеросклероза

Гипотеза. Наша гипотеза состоит в том, что коронарный атеросклероз вызывает как количественные, так и качественные модификации циркулирующих белков, которые можно зафиксировать с помощью дифференциального протеомного подхода, применяемого к образцам сыворотки или плазмы. Выявление таких изменений в циркулирующей крови пациентов с ИБС (по сравнению с пациентами без ИБС) и/или пациентов с острыми коронарными синдромами (по сравнению со стабильной ИБС) может привести к открытию новых биомаркеров коронарного атеросклероза и восприимчивость к атеросклеротическим бляшкам.

Цели:

Основная цель: Идентификация новых циркулирующих биомаркеров стабильной и нестабильной ишемической болезни сердца с использованием нового подхода дифференциальной протеомики.

Второстепенные цели:

• Оценка диагностической ценности этих новых биомаркеров для диагностики стабильной и нестабильной ишемической болезни сердца.
• Сравнение диагностической ценности этих новых биомаркеров с диагностической ценностью 1) других проверенных биомаркеров атеросклероза (например, CRP, IL-6, CD40L, маркеры активации лейкоцитов, …); и 2) неинвазивных измерений функции артерий (например, толщина комплекса интима-медиа сонных артерий, скорость пульсовой волны, лодыжечно-плечевой индекс, …)
• Описание взаимосвязи между этими новыми биомаркерами и серьезными неблагоприятными коронарными событиями (смерть, инфаркт миокарда, реваскуляризация) в течение 12-месячного наблюдения.

Методы:

Центр Uniq, проспективное исследование. Будут обследованы три группы пациентов. Группа 1: острый инфаркт миокарда без подъема сегмента ST; Группа 2: Стабильная ишемическая болезнь сердца; Группа 3: нормальные коронарные артерии и отсутствие других выявляемых атеросклеротических поражений.

Новый протеомный подход будет применяться к образцам сыворотки и плазмы, полученным через 1 месяц после индексной госпитализации. Этот подход включает 3 этапа: 1) выравнивание циркулирующих белков (обнажение низкоконцентрированных белков, принадлежащих к «глубокому протеому»); 2) удерживающая хроматография; и 3) разделение белков с использованием 2D-электрофореза и времяпролетной лазерной десорбции/ионизации с поверхностным усилением (SELDI-TOF).

Биомаркеры с наивысшей диагностической ценностью будут впоследствии идентифицированы с использованием времяпролетной лазерной десорбции/ионизации с матрицей (MALDI-TOF) и тандемной масс-спектрометрии (МС/МС).

Перспективы:

Валидация диагностических и прогностических значений новых биомаркеров, обнаруженных и идентифицированных с использованием описанного выше протеомного подхода, потребует разработки более простых методов измерения (например, ELISA), которые будут использоваться проспективно или ретроспективно в других когортах пациентов с ишемической болезнью сердца. . Параллельно будут проводиться основные исследования, чтобы лучше понять роль этих новых биомаркеров в патофизиологии атеросклероза.