Scoperta di nuovi biomarcatori circolanti di aterosclerosi coronarica

Ipotesi: la nostra ipotesi è che l'aterosclerosi coronarica induca modifiche sia quantitative che qualitative delle proteine ​​circolanti, che possono essere catturate da un approccio proteomico differenziale applicato a campioni di siero o plasma. L'identificazione di tali modificazioni nel sangue circolante di pazienti con malattia coronarica (rispetto a pazienti senza malattia coronarica) e/o di pazienti con sindromi coronariche acute (rispetto a malattia coronarica stabile) può portare alla scoperta di nuovi biomarcatori di aterosclerosi coronarica e di Vulnerabilità della placca aterosclerotica.

Obiettivi:

Obiettivo primario: Identificazione di nuovi biomarcatori circolanti di malattia coronarica stabile e instabile utilizzando un nuovo approccio di proteomica differenziale.

Obiettivi secondari:

• Valutazione del valore diagnostico di questi nuovi biomarcatori per la diagnosi di malattia coronarica stabile e instabile.
• Confronto del valore diagnostico di questi nuovi biomarcatori con il valore diagnostico di 1) altri biomarcatori validati di aterosclerosi (ad es. CRP, IL-6, CD40L, marcatori di attivazione leucocitaria, …); e 2) di misure non invasive della funzione arteriosa (p. es., spessore intima-media dell'arteria carotide, velocità dell'onda del polso, indice caviglia/brachiale, …)
• Descrizione della relazione tra questi nuovi biomarcatori e i principali eventi coronarici avversi (morte, infarto del miocardio, rivascolarizzazione) durante un follow-up di 12 mesi.

Metodi:

Centro Uniq, studio prospettico. Saranno studiati tre gruppi di pazienti. Gruppo 1: infarto miocardico acuto senza sopraslivellamento del tratto ST; Gruppo 2: malattia coronarica stabile; Gruppo 3: arterie coronarie normali e assenza di altre lesioni aterosclerotiche rilevabili.

Un nuovo approccio proteomico verrà applicato ai campioni di siero e plasma ottenuti 1 mese dopo il ricovero indice. Questo approccio comprende 3 fasi: 1) equalizzazione delle proteine ​​circolanti (esporre le proteine ​​a bassa concentrazione appartenenti al "proteoma profondo"); 2) Cromatografia di ritenzione; e 3) separazione delle proteine ​​mediante elettroforesi 2D e tempo di volo di desorbimento/ionizzazione laser con superficie migliorata (SELDI-TOF).

I biomarcatori con il più alto valore diagnostico saranno successivamente identificati utilizzando Matrix-Assisted Laser Desorbtion/Ionization Time-of-Flight (MALDI-TOF) e spettrometria di massa tandem (MS/MS).

Prospettive:

La convalida dei valori diagnostici e prognostici dei nuovi biomarcatori scoperti e identificati utilizzando l'approccio proteomico sopra descritto richiederà lo sviluppo di tecniche di misurazione più dirette (ad es. ELISA), che saranno utilizzate in modo prospettico o retrospettivo in altre coorti di pazienti con malattia coronarica . Parallelamente verranno condotti studi di base, in modo da comprendere meglio il ruolo di questi nuovi biomarcatori nella fisiopatologia dell'aterosclerosi.