Pilot- och genomförbarhetsstudie av hematopoetisk stamcellsgenöverföring för Wiskott-Aldrichs syndrom

Wiskott-Aldrichs syndrom (WAS) (OMIM 301000) är en sällsynt X-länkad immunbrist som orsakas av mutationer i en enskild gen, WAS, kartläggning till Xp11.22-Xp11.3 och kodning för Wiskott-Aldrich Syndrome Protein (WASP) 1. WASP är en kritisk regulator av aktinsignalering med uttryck begränsat till hematopoetiska celler och krävs därför för flera funktioner inklusive T-cellsaktivering, dendritisk cellmigration och podosombildning och B cellterminal utveckling och funktion. WAS kännetecknas av mikrotrombocytopeni, återkommande infektioner, eksem och förknippas med en hög förekomst av autoimmunitet och lymfoida maligniteter. Klassisk eller svår WAS, observeras i allmänhet hos patienter med nonsensmutationer eller insertioner/deletioner som resulterar i ramförskjutning eller splitsningsställe-mutationer eller missense-mutationer och resulterar i instabilt protein 2. Med få undantag har WASP-negativa patienter klassisk sjukdom. Drabbade patienter har en kraftigt minskad livslängd.

För närvarande är det enda botande alternativet för WAS-patienter hematopoetisk stamcellstransplantation (HSCT). Denna behandling är mest framgångsrik när ett HLA-identiskt syskon eller en matchad obesläktad givare är tillgänglig och resulterar i korrigering av mikrotrombocytopeni och immundysfunktion, även när stabil blandad chimerism inträffar. Men även patienter som genomgår matchad HSCT kan lida av avsevärd sjuklighet och mortalitet på grund av graft versus host disease (GVHD) och många patienter saknar en HLA-identisk donator. Resultatet av felaktigt relaterad HSCT är genomgående dåligt med en överlevnad på cirka 50 %. Genöverföring är en attraktiv alternativ behandling för WAS. Framgångsrik genöverföring med autolog genkorrigerad HSC skulle övervinna kliniska komplikationer kopplade till GVHD och dess behandling. Dessutom, i motsats till allogen HSCT, skulle genöverföring inte begränsas av tillgången på kompatibla donatorer. Flera bevis tyder på att partiell rekonstitution med genkorrigerade celler kan vara tillräcklig för att lindra sjukdomen.

Vi föreslår här en pilot- och genomförbarhetsstudie av ex vivo-genöverföring med användning av en lentiviral vektor (LV) för att transducera autolog benmärgshärledd CD34+ HSC. Celler kommer att infunderas i patienter konditionerade med cytoreduktiv kemoterapi. Våra samarbetande utredare i Europa har utvecklat en LV som kodar för det mänskliga WAS-cDNA:t under kontroll av WAS-promotorn och pseudotypat med glykoproteinhöljet Vesicular Stomatitis Virus (VSVg). Denna w1.6_hWASP_WPRE (VSVg) LV (förkortad som w1.6W) har visat sig vara effektiv i både in vitro och in vivo prekliniska modeller. Säkerhet inklusive cellulär toxicitet, insättningsmutagenes och tumörbildning har studerats med ett antal metoder inklusive: 1) en känslig in vitro transformationsanalys, 2) toxicitetsstudier i transducerade humana CD34+-celler, 3) undersökning av insättningsmönstret i transducerade murina celler och 4) långtidsobservationer och sekundära transplantationsstudier på möss. I USA planerar vi att registrera 5 pojkar med klassisk WAS som saknar en matchad närstående eller icke-närstående donator. Parallella studier (ej under vår Investigational New Drug-ansökan) med samma LV som produceras i samma anläggning, Genethon, kommer att genomföras i London, Storbritannien (5 försökspersoner) och Paris, Frankrike (5 försökspersoner). Det primära målet kommer att vara att visa genomförbarhet och säkerhet. Det sekundära målet kommer att vara att bedöma terapeutisk effekt.