Estudio piloto y de viabilidad de la transferencia de genes de células madre hematopoyéticas para el síndrome de Wiskott-Aldrich

El síndrome de Wiskott-Aldrich (WAS) (OMIM 301000) es una inmunodeficiencia rara ligada al cromosoma X causada por mutaciones en un solo gen, WAS, mapeado en Xp11.22-Xp11.3 y la codificación de la proteína del síndrome de Wiskott-Aldrich (WASP) 1. WASP es un regulador crítico de la señalización de actina con expresión limitada a las células hematopoyéticas y, por lo tanto, se requiere para múltiples funciones, incluida la activación de células T, la migración de células dendríticas y la formación de podosomas, y B desarrollo y función de la terminal celular. WAS se caracteriza por microtrombocitopenia, infecciones recurrentes, eczema y se asocia con una alta incidencia de autoinmunidad y de neoplasias linfoides. El WAS clásico o grave generalmente se observa en pacientes con mutaciones sin sentido o inserciones/deleciones que dan como resultado cambios en el marco de lectura o mutaciones en el sitio de empalme o mutaciones sin sentido y dan como resultado proteína 2 inestable. Con pocas excepciones, los pacientes con WASP negativo tienen enfermedad clásica. Los pacientes afectados tienen una esperanza de vida muy reducida.

Actualmente, la única opción curativa para los pacientes con WAS es el trasplante de células madre hematopoyéticas (TPH). Este tratamiento tiene más éxito cuando se dispone de un hermano con HLA idéntico o de un donante no emparentado compatible y da como resultado la corrección de la microtrombocitopenia y la disfunción inmunitaria, incluso cuando se produce un quimerismo mixto estable. Sin embargo, incluso los pacientes que se someten a un HSCT compatible pueden sufrir una morbilidad y mortalidad considerables debido a la enfermedad de injerto contra huésped (EICH) y muchos pacientes carecen de un donante HLA idéntico. El resultado del HSCT relacionado no coincidente es consistentemente pobre con una supervivencia de aproximadamente 50%. La transferencia de genes es un tratamiento alternativo atractivo para WAS. La transferencia exitosa de genes utilizando HSC con corrección genética autóloga superaría las complicaciones clínicas relacionadas con la GVHD y su tratamiento. Además, a diferencia del HSCT alogénico, la transferencia de genes no estaría limitada por la disponibilidad de donantes compatibles. Varias líneas de evidencia indican que la reconstitución parcial con células con corrección genética puede ser suficiente para mejorar la enfermedad.

Proponemos aquí un estudio piloto y de viabilidad de la transferencia de genes ex vivo usando un vector lentiviral (LV) para transducir HSC CD34+ derivadas de médula ósea autóloga. Las células se infundirán en pacientes condicionados con quimioterapia citorreductora. Nuestros investigadores colaboradores en Europa han desarrollado un LV que codifica el ADNc de WAS humano bajo el control del promotor de WAS y seudotipado con la envoltura de glicoproteína del virus de la estomatitis vesicular (VSVg). Se ha demostrado que este LV w1.6_hWASP_WPRE (VSVg) (abreviado como w1.6W) es eficaz en modelos preclínicos in vitro e in vivo. La seguridad, incluida la toxicidad celular, la mutagénesis por inserción y la formación de tumores, se ha estudiado mediante una serie de métodos que incluyen: 1) un ensayo de transformación in vitro sensible, 2) estudios de toxicidad en células CD34+ humanas transducidas, 3) examen del patrón de inserción en células murinas transducidas y 4) observación a largo plazo y estudios secundarios de trasplante en ratones. En los Estados Unidos, planeamos inscribir a 5 niños con WAS clásico que carecen de un donante relacionado o no relacionado compatible. Se llevarán a cabo estudios paralelos (no bajo nuestra solicitud de nuevo fármaco en investigación) utilizando el mismo LV producido en las mismas instalaciones, Genethon, en Londres, Reino Unido (5 sujetos) y París, Francia (5 sujetos). El objetivo principal será demostrar la viabilidad y la seguridad. El objetivo secundario será evaluar la eficacia terapéutica.