Pilot- og mulighetsstudie av hematopoietisk stamcelle-genoverføring for Wiskott-Aldrich-syndromet

Wiskott-Aldrich syndrom (WAS) (OMIM 301000) er en sjelden X-bundet immunsvikt forårsaket av mutasjoner i et enkelt gen, WAS, som er kartlagt til Xp11.22-Xp11.3 og koding for Wiskott-Aldrich Syndrome Protein (WASP) 1. WASP er en kritisk regulator av aktinsignalering med ekspresjon begrenset til hematopoietiske celler, og er derfor nødvendig for flere funksjoner, inkludert T-celleaktivering, dendritisk cellemigrasjon og podosomdannelse, og B celleterminal utvikling og funksjon. WAS er preget av mikrotrombocytopeni, tilbakevendende infeksjoner, eksem og assosiert med høy forekomst av autoimmunitet og lymfoide maligniteter. Klassisk eller alvorlig WAS, er generelt observert hos pasienter med nonsens-mutasjoner eller insersjoner/delesjoner som resulterer i rammeskifte eller spleisested-mutasjoner eller missense-mutasjoner og resulterer i ustabilt protein 2. Med få unntak har WASP-negative pasienter klassisk sykdom. Berørte pasienter har sterkt redusert levealder.

Foreløpig er det eneste kurative alternativet for WAS-pasienter hematopoetisk stamcelletransplantasjon (HSCT). Denne behandlingen er mest vellykket når en HLA-identisk søsken eller matchet urelatert donor er tilgjengelig og resulterer i korreksjon av mikrotrombocytopeni og immundysfunksjon, selv når stabil blandet kimærisme oppstår. Imidlertid kan selv pasienter som gjennomgår matchet HSCT lider av betydelig sykelighet og dødelighet på grunn av graft versus host disease (GVHD), og mange pasienter mangler en HLA-identisk donor. Utfallet av feiltilpasset relatert HSCT er konsekvent dårlig med overlevelse på omtrent 50 %. Genoverføring er en attraktiv alternativ behandling for WAS. Vellykket genoverføring ved bruk av autolog genkorrigert HSC ville overvinne kliniske komplikasjoner knyttet til GVHD og dens behandling. Videre, i motsetning til allogen HSCT, ville ikke genoverføring være begrenset av tilgjengeligheten av kompatible givere. Flere bevis tyder på at delvis rekonstitusjon med genkorrigerte celler kan være tilstrekkelig for å lindre sykdommen.

Vi foreslår her en pilot- og gjennomførbarhetsstudie av ex vivo-genoverføring ved bruk av en lentiviral vektor (LV) for å transdusere autolog benmargsavledet CD34+ HSC. Celler vil bli infundert i pasienter kondisjonert med cytoreduktiv kjemoterapi. Våre samarbeidende etterforskere i Europa har utviklet en LV som koder for humant WAS-cDNA under kontroll av WAS-promoteren og pseudotypet med Vesicular Stomatitis Virus glycoprotein (VSVg) konvolutten. Denne w1.6_hWASP_WPRE (VSVg) LV (forkortet w1.6W) har vist seg å være effektiv i både in vitro og in vivo prekliniske modeller. Sikkerhet inkludert cellulær toksisitet, insersjonsmutagenese og tumordannelse har blitt studert ved en rekke metoder, inkludert: 1) en sensitiv in vitro transformasjonsanalyse, 2) toksisitetsstudier i transduserte humane CD34+-celler, 3) undersøkelse av innsettingsmønsteret i transduserte murine celler , og 4) langtidsobservasjon og sekundære transplantasjonsstudier på mus. I USA planlegger vi å registrere 5 gutter med klassisk WAS som mangler en matchet relatert eller urelatert donor. Parallelle studier (ikke under vår Investigational New Drug-applikasjon) med samme LV produsert i samme anlegg, Genethon, vil bli utført i London, Storbritannia (5 forsøkspersoner) og Paris, Frankrike (5 forsøkspersoner). Hovedmålet vil være å demonstrere gjennomførbarhet og sikkerhet. Det sekundære målet vil være å vurdere terapeutisk effekt.