Pilot en haalbaarheidsstudie van genoverdracht van hematopoietische stamcellen voor het Wiskott-Aldrich-syndroom

Wiskott-Aldrich-syndroom (WAS) (OMIM 301000) is een zeldzame X-gebonden immunodeficiëntie veroorzaakt door mutaties in een enkel gen, WAS, in kaart gebracht op Xp11.22-Xp11.3 en codering voor het Wiskott-Aldrich Syndrome Protein (WASP) 1. WASP is een kritische regulator van actinesignalering met expressie beperkt tot hematopoëtische cellen, en is dus vereist voor meerdere functies, waaronder T-celactivering, dendritische celmigratie en podosome-vorming, en B ontwikkeling en functie van celterminals. WAS wordt gekenmerkt door microtrombocytopenie, terugkerende infecties, eczeem en gaat gepaard met een hoge incidentie van auto-immuniteit en lymfoïde maligniteiten. Klassieke of ernstige WAS wordt over het algemeen waargenomen bij patiënten met nonsensmutaties of inserties/deleties die leiden tot frameshift- of splice-site-mutaties of missense-mutaties en resulterend in onstabiel eiwit 2. Op enkele uitzonderingen na hebben WASP-negatieve patiënten klassieke ziekte. Getroffen patiënten hebben een sterk verminderde levensverwachting.

Momenteel is de enige curatieve optie voor WAS-patiënten hematopoëtische stamceltransplantatie (HSCT). Deze behandeling is het meest succesvol wanneer een HLA-identieke broer of zus of gematchte niet-verwante donor beschikbaar is en resulteert in correctie van microtrombocytopenie en immuundisfunctie, zelfs wanneer stabiel gemengd chimerisme optreedt. Zelfs patiënten die een gematchte HSCT ondergaan, kunnen echter lijden aan aanzienlijke morbiditeit en mortaliteit als gevolg van graft-versus-hostziekte (GVHD) en veel patiënten missen een HLA-identieke donor. De uitkomst van niet-overeenkomende gerelateerde HSCT is consistent slecht met een overleving van ongeveer 50%. Genoverdracht is een aantrekkelijke alternatieve behandeling voor WAS. Succesvolle genoverdracht met behulp van autologe gen-gecorrigeerde HSC zou klinische complicaties in verband met GVHD en de behandeling ervan overwinnen. Bovendien zou genoverdracht, in tegenstelling tot allogene HSCT, niet worden beperkt door de beschikbaarheid van compatibele donoren. Verschillende bewijslijnen geven aan dat gedeeltelijke reconstitutie met gen-gecorrigeerde cellen voldoende kan zijn om de ziekte te verbeteren.

We stellen hier een pilot- en haalbaarheidsstudie voor van ex vivo genoverdracht met behulp van een lentivirale vector (LV) om uit autoloog beenmerg afgeleid CD34 + HSC te transduceren. Cellen zullen worden toegediend aan patiënten die zijn geconditioneerd met cytoreductieve chemotherapie. Onze samenwerkende onderzoekers in Europa hebben een LV ontwikkeld die codeert voor het menselijke WAS-cDNA onder controle van de WAS-promoter en gepseudotypeerd met de Vesicular Stomatitis Virus-glycoproteïne (VSVg)-envelop. Deze w1.6_hWASP_WPRE (VSVg) LV (afgekort als w1.6W) is werkzaam gebleken in zowel in vitro als in vivo preklinische modellen. De veiligheid, waaronder cellulaire toxiciteit, insertiemutagenese en tumorvorming, is onderzocht met een aantal methoden, waaronder: 1) een gevoelige in vitro transformatietest, 2) toxiciteitsonderzoeken in getransduceerde humane CD34+-cellen, 3) onderzoek van het insertiepatroon in getransduceerde muizencellen en 4) langetermijnobservatie en secundaire transplantatiestudies bij muizen. In de Verenigde Staten zijn we van plan om 5 jongens met klassieke WAS in te schrijven die geen gematchte verwante of niet-verwante donor hebben. Parallelle studies (niet onder onze Investigational New Drug-applicatie) met dezelfde LV geproduceerd in dezelfde faciliteit, Genethon, zullen worden uitgevoerd in Londen, VK (5 proefpersonen) en Parijs, Frankrijk (5 proefpersonen). Het primaire doel zal zijn om de haalbaarheid en veiligheid aan te tonen. Het secundaire doel zal zijn om de therapeutische werkzaamheid te beoordelen.