Étude pilote et de faisabilité du transfert de gènes de cellules souches hématopoïétiques pour le syndrome de Wiskott-Aldrich

Le syndrome de Wiskott-Aldrich (WAS) (OMIM 301000) est une immunodéficience rare liée à l'X causée par des mutations dans un seul gène, WAS, cartographiant Xp11.22-Xp11.3 et codant pour la protéine du syndrome de Wiskott-Aldrich (WASP) 1. WASP est un régulateur essentiel de la signalisation de l'actine avec une expression limitée aux cellules hématopoïétiques, et est donc nécessaire pour de multiples fonctions, y compris l'activation des cellules T, la migration des cellules dendritiques et la formation de podosomes, et B développement et fonction des terminaux cellulaires. Le WAS est caractérisé par une microthrombocytopénie, des infections récurrentes, un eczéma et est associé à une incidence élevée d'auto-immunité et de tumeurs malignes lymphoïdes. Le WAS classique ou sévère est généralement observé chez les patients présentant des mutations non-sens ou des insertions/délétions entraînant des mutations du cadre de lecture ou du site d'épissage ou des mutations faux-sens et entraînant une protéine 2 instable. À quelques exceptions près, les patients WASP négatifs ont une maladie classique. Les patients atteints ont une espérance de vie fortement réduite.

Actuellement, la seule option curative pour les patients WAS est la greffe de cellules souches hématopoïétiques (GCSH). Ce traitement est plus efficace lorsqu'un frère ou une sœur HLA identique ou un donneur non apparenté compatible est disponible et entraîne une correction de la microthrombocytopénie et du dysfonctionnement immunitaire, même en cas de chimérisme mixte stable. Cependant, même les patients subissant une GCSH appariée peuvent souffrir d'une morbidité et d'une mortalité considérables dues à la maladie du greffon contre l'hôte (GVHD) et de nombreux patients n'ont pas de donneur HLA identique. Le résultat d'une GCSH non concordante est systématiquement médiocre avec une survie d'environ 50 %. Le transfert de gènes est un traitement alternatif intéressant pour le WAS. Un transfert de gène réussi à l'aide de CSH autologues à correction génétique permettrait de surmonter les complications cliniques liées à la GVHD et à son traitement. De plus, contrairement à la HSCT allogénique, le transfert de gènes ne serait pas limité par la disponibilité de donneurs compatibles. Plusieurs éléments de preuve indiquent qu'une reconstitution partielle avec des cellules corrigées par le gène peut être suffisante pour améliorer la maladie.

Nous proposons ici une étude pilote et de faisabilité du transfert de gène ex vivo à l'aide d'un vecteur lentiviral (LV) pour transduire des CSH CD34+ autologues dérivées de la moelle osseuse. Les cellules seront perfusées à des patients conditionnés par chimiothérapie cytoréductrice. Nos chercheurs collaborateurs en Europe ont développé un LV codant pour l'ADNc WAS humain sous le contrôle du promoteur WAS et pseudotypé avec l'enveloppe de la glycoprotéine du virus de la stomatite vésiculaire (VSVg). Ce w1.6_hWASP_WPRE (VSVg) LV (en abrégé w1.6W) s'est avéré efficace dans les modèles précliniques in vitro et in vivo. L'innocuité, y compris la toxicité cellulaire, la mutagenèse insertionnelle et la formation de tumeurs, a été étudiée par un certain nombre de méthodes, notamment : 1) un test de transformation in vitro sensible, 2) des études de toxicité dans des cellules CD34+ humaines transduites, 3) l'examen du schéma d'insertion dans des cellules murines transduites , et 4) des études d'observation à long terme et de transplantation secondaire chez la souris. Aux États-Unis, nous prévoyons d'inscrire 5 garçons atteints de WAS classique qui n'ont pas de donneur apparenté ou non apparenté. Des études parallèles (pas dans le cadre de notre demande de nouveau médicament expérimental) utilisant le même LV produit dans le même établissement, Généthon, seront menées à Londres, au Royaume-Uni (5 sujets) et à Paris, en France (5 sujets). L'objectif principal sera de démontrer la faisabilité et la sécurité. L'objectif secondaire sera d'évaluer l'efficacité thérapeutique.