Raman-spektroskopi jämfört med flödescytometri

Bedömningen av mätbar restsjukdom (MRD) är en frekvent praxis vid behandling av akut lymfatisk leukemi (ALL). Detekteringen av MRD är associerad med en ökad risk för återfall och ogynnsam prognos hos alla patientgrupper som diagnostiserats med ALL. De tre godkända metoderna för MRD-mätning är flödescytometri, polymeraskedjereaktion (PCR) av specifika mutationer och nästa generations sekvensering (NGS). Av dessa är flödescytometri den mest använda metoden i klinisk praxis. Den har dock en känslighetsnivå som detekterar en leukemicell i 10 000 normala celler, tillsammans med andra nackdelar som behovet av en panel av fluorescerande antikroppar för MRD-detektion, och dess mätning är inte standardiserad i många centra. Nya bestämningstekniker kan vara nödvändiga för MRD-utvärdering. Ramanspektroskopi föreslås som en potentiell teknik för MRD-mätning, som är baserad på den oelastiska spridningen av ljus som uppstår när det interagerar med materia, vilket orsakar optisk spridning, där en del av strålningen ändrar sin våglängd (genom Raman-effekten). Genom att analysera det oelastiskt spridda ljuset kan vi erhålla ett Raman-spektrum som bildas av intensiteten hos det spridda ljuset som en funktion av dess vibrationsfrekvens och på så sätt erhålla information om den biokemiska sammansättningen av ett biologiskt prov.

Mål:

HUVUDMÅL:

Att utvärdera förekomsten av MRD hos patienter med ALL genom att jämföra en standardutvärderingsmetod med flödescytometri med en ny föreslagen metod med Raman-spektroskopi.

SÄRSKILDA MÅL:

• Att bedöma förekomsten av MRD med hjälp av flödescytometri hos patienter med ALL.
• Att bedöma förekomsten av MRD med hjälp av Raman-spektroskopi hos patienter med ALL.
• Att utföra en jämförelse mellan MRD-mätteknikerna genom att bestämma sensitivitet, specificitet, positivt prediktivt värde och negativt prediktivt värde.
• Att fastställa valideringen av att använda Raman-spektroskopi som en metod för MRD-utvärdering.

Studera design:

En observations-, tvärsnitts-, jämförande och diagnostisk teststudie kommer att utföras på benmärgsaspiratprover från vuxna och pediatriska ALL-patienter för att utvärdera förekomsten av MRD med hjälp av Raman-spektroskopi, och jämför resultaten av denna teknik med de som erhålls med flödescytometri. Som en diagnostisk teststudie kommer sensitivitet, specificitet, positivt prediktivt värde och negativt prediktivt värde att utvärderas. Studien kommer att genomföras på vuxna och pediatriska patienter som diagnostiserats med akut lymfoblastisk leukemi som behandlas på hemato-onkologiska avdelningen vid UMAE No. 1 National Medical Center Bajio och UMAE Hospital Gynecology-Pediatrics No. 48.

Inklusionskriterier:

Patienter med diagnosen ALL för vilka MRD-bestämning är kliniskt nödvändig kommer att inkluderas i studien. Deras resultat kommer att utvärderas med hjälp av guldstandarden, flödescytometri, och jämföras med resultat som erhållits genom Raman-spektroskopi.