Raman-Spektroskopie im Vergleich zur Durchflusszytometrie

Die Beurteilung der messbaren Resterkrankung (MRD) ist eine häufige Praxis bei der Behandlung der akuten lymphatischen Leukämie (ALL). Der Nachweis einer MRD ist bei allen mit ALL diagnostizierten Patientengruppen mit einem erhöhten Rückfallrisiko und einer ungünstigen Prognose verbunden. Die drei zugelassenen Methoden zur MRD-Messung sind Durchflusszytometrie, Polymerasekettenreaktion (PCR) spezifischer Mutationen und Next-Generation-Sequencing (NGS). Von diesen ist die Durchflusszytometrie die in der klinischen Praxis am häufigsten verwendete Methode. Allerdings verfügt es über eine Empfindlichkeit, die eine Leukämiezelle unter 10.000 normalen Zellen erkennt, und weist weitere Nachteile auf, wie z. B. die Notwendigkeit eines Panels fluoreszierender Antikörper für den MRD-Nachweis, und seine Messung ist in vielen Zentren nicht standardisiert. Für die MRD-Bewertung können neue Bestimmungstechniken erforderlich sein. Als potenzielle Technik zur MRD-Messung wird die Raman-Spektroskopie vorgeschlagen, die auf der inelastischen Streuung von Licht basiert, die bei der Wechselwirkung mit Materie auftritt und eine optische Streuung verursacht, bei der ein Teil der Strahlung seine Wellenlänge ändert (durch den Raman-Effekt). Durch die Analyse des inelastisch gestreuten Lichts können wir ein Raman-Spektrum erhalten, das aus der Intensität des gestreuten Lichts als Funktion seiner Schwingungsfrequenz besteht, und so Informationen über die biochemische Zusammensetzung einer biologischen Probe erhalten.

Ziele:

HAUPTZIEL:

Bewertung des Vorliegens von MRD bei Patienten mit ALL durch Vergleich einer Standardbewertungsmethode mittels Durchflusszytometrie mit einer neuen vorgeschlagenen Methode mittels Raman-Spektroskopie.

BESTIMMTE ZIELE:

• Zur Beurteilung des Vorliegens einer MRD mittels Durchflusszytometrie bei Patienten mit ALL.
• Zur Beurteilung des Vorliegens von MRD mittels Raman-Spektroskopie bei Patienten mit ALL.
• Durchführung eines Vergleichs zwischen den MRD-Messtechniken durch Bestimmung von Sensitivität, Spezifität, positivem Vorhersagewert und negativem Vorhersagewert.
• Etablierung der Validierung der Verwendung der Raman-Spektroskopie als Methode zur MRD-Bewertung.

Studiendesign:

An Knochenmarkaspiratproben von erwachsenen und pädiatrischen ALL-Patienten wird eine Beobachtungs-, Querschnitts-, Vergleichs- und Diagnoseteststudie durchgeführt, um das Vorhandensein von MRD mithilfe der Raman-Spektroskopie zu bewerten und die Ergebnisse dieser Technik mit denen zu vergleichen, die mithilfe der Durchflusszytometrie erhalten wurden. Als diagnostische Teststudie werden Sensitivität, Spezifität, positiver Vorhersagewert und negativer Vorhersagewert bewertet. Die Studie wird an erwachsenen und pädiatrischen Patienten durchgeführt, bei denen akute lymphoblastische Leukämie diagnostiziert wurde und die in der hämatoonkologischen Abteilung des UMAE No.

Einschlusskriterien:

Patienten mit der Diagnose ALL, bei denen eine MRD-Bestimmung klinisch notwendig ist, werden in die Studie einbezogen. Ihre Ergebnisse werden mithilfe des Goldstandards, der Durchflusszytometrie, ausgewertet und mit Ergebnissen der Raman-Spektroskopie verglichen.