Spektroskopia Ramana w porównaniu z cytometrią przepływową

Ocena mierzalnej choroby resztkowej (MRD) jest częstą praktyką w leczeniu ostrej białaczki limfoblastycznej (ALL). Wykrycie MRD wiąże się ze zwiększonym ryzykiem nawrotu choroby i niekorzystnym rokowaniem we wszystkich grupach pacjentów, u których zdiagnozowano ALL. Trzy zatwierdzone metody pomiaru MRD to cytometria przepływowa, reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) określonych mutacji i sekwencjonowanie nowej generacji (NGS). Spośród nich cytometria przepływowa jest najczęściej stosowaną metodą w praktyce klinicznej. Ma jednak poziom czułości wykrywający jedną komórkę białaczkową na 10 000 normalnych komórek, a także inne wady, takie jak konieczność stosowania panelu przeciwciał fluorescencyjnych do wykrywania MRD, a jego pomiar nie jest standaryzowany w wielu ośrodkach. Do oceny MRD mogą być konieczne nowe techniki oznaczania. Jako potencjalną technikę pomiaru MRD proponuje się spektroskopię Ramana, która opiera się na nieelastycznym rozpraszaniu światła zachodzącym podczas jego interakcji z materią, powodując rozpraszanie optyczne, podczas którego część promieniowania zmienia swoją długość fali (w wyniku efektu Ramana). Analizując światło nieelastycznie rozproszone, możemy otrzymać widmo Ramana utworzone przez natężenie rozproszonego światła w funkcji częstotliwości jego drgań, uzyskując w ten sposób informację o składzie biochemicznym próbki biologicznej.

Cele:

GŁOWNY CEL:

Ocena obecności MRD u pacjentów z ALL poprzez porównanie standardowej metody oceny wykorzystującej cytometrię przepływową z nową proponowaną metodą wykorzystującą spektroskopię Ramana.

KONKRETNE CELE:

• Ocena obecności MRD za pomocą cytometrii przepływowej u pacjentów z ALL.
• Ocena obecności MRD za pomocą spektroskopii Ramana u pacjentów z ALL.
• Aby przeprowadzić porównanie technik pomiaru MRD poprzez określenie czułości, swoistości, dodatniej i ujemnej wartości predykcyjnej.
• Ustalenie walidacji stosowania spektroskopii Ramana jako metody oceny MRD.

Projekt badania:

Przeprowadzone zostanie badanie obserwacyjne, przekrojowe, porównawcze i diagnostyczne na próbkach aspiratu szpiku kostnego od dorosłych i dzieci i młodzieży z ALL w celu oceny obecności MRD za pomocą spektroskopii Ramana, porównując wyniki tej techniki z wynikami uzyskanymi za pomocą cytometrii przepływowej. W ramach testu diagnostycznego oceniana będzie czułość, swoistość, dodatnia i ujemna wartość predykcyjna. Badaniem zostaną objęci pacjenci dorośli i dzieci z rozpoznaną ostrą białaczką limfoblastyczną leczeni na oddziale hematoonkologii Narodowego Centrum Medycznego UMAE nr 1 Bajio oraz Szpitala Ginekologiczno-Pediatrycznego nr 48 UMAE.

Kryteria przyjęcia:

Do badania zostaną włączeni pacjenci ze zdiagnozowaną ALL, u których oznaczenie MRD jest klinicznie konieczne. Ich wyniki zostaną ocenione przy użyciu złotego standardu, cytometrii przepływowej, i porównane z wynikami uzyskanymi za pomocą spektroskopii Ramana.