Ramanova spektroskopie ve srovnání s průtokovou cytometrií

Hodnocení měřitelné reziduální nemoci (MRD) je častou praxí v léčbě akutní lymfoblastické leukémie (ALL). Detekce MRD je spojena se zvýšeným rizikem relapsu a nepříznivou prognózou u všech skupin pacientů s diagnostikovanou ALL. Tři schválené metody pro měření MRD jsou průtoková cytometrie, polymerázová řetězová reakce (PCR) specifických mutací a sekvenování nové generace (NGS). Z nich je v klinické praxi nejpoužívanější metodou průtoková cytometrie. Má však úroveň citlivosti, která detekuje jednu leukemickou buňku na 10 000 normálních buněk, spolu s dalšími nevýhodami, jako je potřeba panelu fluorescenčních protilátek pro detekci MRD, a její měření není v mnoha centrech standardizováno. Pro hodnocení MRD mohou být nezbytné nové techniky stanovení. Ramanova spektroskopie je navržena jako potenciální technika pro měření MRD, která je založena na nepružném rozptylu světla, ke kterému dochází při jeho interakci s hmotou, což způsobuje optický rozptyl, kdy část záření mění svou vlnovou délku (Ramanovým efektem). Analýzou neelasticky rozptýleného světla můžeme získat Ramanovo spektrum tvořené intenzitou rozptýleného světla jako funkce jeho vibrační frekvence, čímž získáme informaci o biochemickém složení biologického vzorku.

Cíle:

HLAVNÍ CÍL:

Vyhodnotit přítomnost MRD u pacientů s ALL porovnáním standardní metody hodnocení pomocí průtokové cytometrie s nově navrženou metodou využívající Ramanovu spektroskopii.

KONKRÉTNÍ CÍLE:

• Posoudit přítomnost MRD pomocí průtokové cytometrie u pacientů s ALL.
• Posoudit přítomnost MRD pomocí Ramanovy spektroskopie u pacientů s ALL.
• Provést srovnání mezi technikami měření MRD stanovením citlivosti, specificity, pozitivní prediktivní hodnoty a negativní prediktivní hodnoty.
• Založit validaci použití Ramanovy spektroskopie jako metody pro hodnocení MRD.

Studovat design:

Observační, průřezová, srovnávací a diagnostická testová studie bude provedena na vzorcích aspirátu kostní dřeně od dospělých a dětských pacientů s ALL, aby se vyhodnotila přítomnost MRD pomocí Ramanovy spektroskopie, přičemž výsledky této techniky byly porovnány s výsledky získanými pomocí průtokové cytometrie. Jako diagnostická testová studie bude hodnocena senzitivita, specificita, pozitivní prediktivní hodnota a negativní prediktivní hodnota. Studie bude provedena na dospělých a dětských pacientech s diagnózou akutní lymfoblastické leukémie léčených na hemato-onkologickém oddělení UMAE No. 1 National Medical Center Bajio a UMAE Hospital Gynecology-Pediatrics č. 48.

Kritéria pro zařazení:

Do studie budou zařazeni pacienti s diagnózou ALL, u kterých je stanovení MRD klinicky nezbytné. Jejich výsledky budou vyhodnoceny pomocí zlatého standardu, průtokové cytometrie a porovnány s výsledky získanými pomocí Ramanovy spektroskopie.