Espectroscopia Raman comparada con la citometría de flujo

La evaluación de la enfermedad residual mensurable (ERM) es una práctica frecuente en el tratamiento de la leucemia linfoblástica aguda (LLA). La detección de ERM se asocia con un mayor riesgo de recaída y pronóstico adverso en todos los grupos de pacientes diagnosticados con LLA. Los tres métodos aprobados para la medición de MRD son la citometría de flujo, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de mutaciones específicas y la secuenciación de próxima generación (NGS). De ellos, la citometría de flujo es el método más utilizado en la práctica clínica. Sin embargo, tiene un nivel de sensibilidad que detecta una célula leucémica por cada 10.000 células normales, junto con otras desventajas como la necesidad de un panel de anticuerpos fluorescentes para la detección de ERM, y su medición no está estandarizada en muchos centros. Es posible que se necesiten nuevas técnicas de determinación para la evaluación de MRD. La espectroscopia Raman se propone como una técnica potencial para la medición de MRD, la cual se basa en la dispersión inelástica de la luz que ocurre cuando interactúa con la materia, causando dispersión óptica, donde una porción de la radiación cambia su longitud de onda (por efecto Raman). Analizando la luz dispersada inelásticamente podemos obtener un espectro Raman formado por la intensidad de la luz dispersada en función de su frecuencia de vibración, obteniendo así información sobre la composición bioquímica de una muestra biológica.

Objetivos:

OBJETIVO PRINCIPAL:

Evaluar la presencia de ERM en pacientes con LLA comparando un método de evaluación estándar que utiliza citometría de flujo con un nuevo método propuesto que utiliza espectroscopia Raman.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

• Evaluar la presencia de ERM mediante citometría de flujo en pacientes con LLA.
• Evaluar la presencia de ERM mediante espectroscopia Raman en pacientes con LLA.
• Realizar una comparación entre las técnicas de medición de MRD determinando la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo.
• Establecer la validación del uso de espectroscopía Raman como método para la evaluación de MRD.

Diseño del estudio:

Se realizará un estudio observacional, transversal, comparativo y de pruebas diagnósticas en muestras de aspirado de médula ósea de pacientes adultos y pediátricos con LLA para evaluar la presencia de ERM mediante espectroscopia Raman, comparando los resultados de esta técnica con los obtenidos mediante citometría de flujo. Como estudio de prueba diagnóstica, se evaluará la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo. El estudio se realizará en pacientes adultos y pediátricos con diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda atendidos en el departamento de hematooncología de la UMAE No. 1 Centro Médico Nacional Bajío y del Hospital Ginecología-Pediatría No. 48 de la UMAE.

Criterios de inclusión:

Se incluirán en el estudio los pacientes diagnosticados de LLA para quienes la determinación de ERM sea clínicamente necesaria. Sus resultados se evaluarán utilizando el estándar de oro, la citometría de flujo, y se compararán con los resultados obtenidos mediante espectroscopia Raman.