Spettroscopia Raman rispetto alla citometria a flusso

La valutazione della malattia residua misurabile (MRD) è una pratica frequente nella gestione della leucemia linfoblastica acuta (LLA). L'individuazione della MRD è associata a un aumento del rischio di recidiva e di prognosi sfavorevole in tutti i gruppi di pazienti con diagnosi di LLA. I tre metodi approvati per la misurazione della MRD sono la citometria a flusso, la reazione a catena della polimerasi (PCR) di mutazioni specifiche e il sequenziamento di nuova generazione (NGS). Di questi, la citometria a flusso è il metodo più utilizzato nella pratica clinica. Tuttavia, ha un livello di sensibilità che rileva una cellula leucemica su 10.000 cellule normali, oltre ad altri svantaggi come la necessità di un pannello di anticorpi fluorescenti per il rilevamento della MRD e la sua misurazione non è standardizzata in molti centri. Potrebbero essere necessarie nuove tecniche di determinazione per la valutazione della MRD. La spettroscopia Raman è proposta come una potenziale tecnica per la misurazione MRD, che si basa sulla diffusione anelastica della luce che si verifica quando interagisce con la materia, causando diffusione ottica, dove una porzione della radiazione cambia la sua lunghezza d'onda (per effetto Raman). Analizzando la luce diffusa anelasticamente, possiamo ottenere uno spettro Raman formato dall'intensità della luce diffusa in funzione della sua frequenza di vibrazione, ottenendo così informazioni sulla composizione biochimica di un campione biologico.

Obiettivi:

OBIETTIVO PRINCIPALE:

Valutare la presenza di MRD nei pazienti affetti da LLA confrontando un metodo di valutazione standard utilizzando la citometria a flusso con un nuovo metodo proposto utilizzando la spettroscopia Raman.

OBIETTIVI SPECIFICI:

• Valutare la presenza di MRD utilizzando la citometria a flusso in pazienti affetti da LLA.
• Valutare la presenza di MRD utilizzando la spettroscopia Raman in pazienti affetti da LLA.
• Eseguire un confronto tra le tecniche di misurazione della MRD determinando sensibilità, specificità, valore predittivo positivo e valore predittivo negativo.
• Stabilire la validazione dell'utilizzo della spettroscopia Raman come metodo per la valutazione della MRD.

Progettazione dello studio:

Verrà condotto uno studio osservazionale, trasversale, comparativo e diagnostico su campioni di aspirato di midollo osseo di pazienti adulti e pediatrici con LLA per valutare la presenza di MRD utilizzando la spettroscopia Raman, confrontando i risultati di questa tecnica con quelli ottenuti utilizzando la citometria a flusso. Come studio di test diagnostico, verranno valutati la sensibilità, la specificità, il valore predittivo positivo e il valore predittivo negativo. Lo studio sarà condotto su pazienti adulti e pediatrici con diagnosi di leucemia linfoblastica acuta trattati presso il dipartimento di emato-oncologia del Centro medico nazionale Bajio n. 1 dell'UMAE e dell'Ospedale Ginecologia-Pediatria n. 48 dell'UMAE.

Criterio di inclusione:

Saranno inclusi nello studio i pazienti con diagnosi di ALL per i quali la determinazione della MRD è clinicamente necessaria. I loro risultati saranno valutati utilizzando il gold standard, la citometria a flusso, e confrontati con i risultati ottenuti tramite la spettroscopia Raman.