HCV + 饮酒者和非饮酒者的抗病毒和抗纤维化肝脏治疗

目前对 HCV 疾病的治疗集中于抗病毒治疗。 聚乙二醇干扰素和利巴韦林的组合被 FDA 批准用于治疗 HCV 疾病。 本研究中的受试者将接受利巴韦林和聚乙二醇干扰素。 该提案的一个创新方面是，最先进的抗病毒治疗将辅以抗纤维化药物，即多烯磷脂酰胆碱 (PPC) 或安慰剂，以双盲随机方式给药。 目前的治疗侧重于抗病毒治疗，而忽视了导致 HCV 患者出现医学症状和最终死亡的原因是肝纤维化、由此产生的肝硬化和相关并发症，包括肝细胞癌。 如果可以停止甚至阻止纤维化过程，丙型肝炎病毒将失去其对健康的大部分影响。 可用的抗纤维化药物毒性太大，不能用于患者，除了一种，即 PPC，它已在各种实验模型中显示出显着的抗纤维化作用，最近在一项欧洲研究中发现它是有益的丙型肝炎患者的转氨酶循环水平。 各种研究表明 HCV 与氧化应激有关，因此值得注意的是，发现 PPC 也具有显着的抗氧化作用。

该研究已获得每个中心的机构审查委员会的批准，并且所有患者都获得了书面知情同意书。 筛选后，患者被随机分配到 2 个治疗组（PPC 或安慰剂组）之一。 两个治疗组联合使用聚乙二醇干扰素（180 μg，每周注射一次）（Shiffman 等人，1999 年；Sulkowski 等人，1999 年）和利巴韦林，持续 48 周（基因型 I）或 24 周（其他基因型）。 如果后者在 HCV RNA 方面没有反应，他们也会接受 48 周的治疗。 利巴韦林每天口服给药两次，对于体重 75 公斤或以下的患者，每日总剂量为 1000 毫克，对于体重超过 75 公斤的患者，每日总剂量为 1200 毫克。 这些药物同时开始和停止，给每位患者服用 PPC（每天 5 片 0.9 克咀嚼片）或相应的安慰剂（从 PHOSPHOLIPID GmbH 获得，Rhone-Poulenc Rorer 的继任者，德国科隆） 3年。

每 2 周随访一次血红蛋白下降超过 2 g/dL 的患者，直至病情稳定。 对于血红蛋白浓度低于 10 g/dL 的患者，利巴韦林的剂量减至 600 mg/d，如果浓度低于 8.5 g/dL，则停药。 对于除贫血以外的严重不良事件，干扰素的剂量减半，利巴韦林的剂量减至每天 600 毫克。 事件发生后可以恢复全剂量，如果效果持续存在则停药。

在干扰素-利巴韦林-PPC（或安慰剂）治疗的 24-48 周期间以及随后的 PPC（安慰剂）治疗期间，在第 1、2、4 周时将患者作为门诊患者进行评估，然后每 4 周进行一次评估。 停止抗病毒治疗后，如果根据研究者的判断，这种灵活的时间表不会对患者护理产生负面影响，但会对患者保留产生积极影响，则可以每季度对研究患者进行一次检查。 生化测试由中央实验室进行。 在治疗前、干扰素-利巴韦林治疗期间第 24 周和 48 周、干扰素-利巴韦林治疗后第 18、24 和 30 个月以及 3 年末测定血浆 HCV RNA 水平。 血浆 HCV RNA 通过定量逆转录聚合酶链反应测定法（Cobas Amplicor for HCV Monitor v.2，Roche Diagnostic Systems, Inc.）测量，灵敏度为 3000 IU/ml，线性度高达 2.5 X 106 国际单位/毫升。 用具有 60 IU/ml 灵敏度的定性 HCV-PCR 测定法（Cobas Amplicor for HCV 2.0，Roche Diagnostic Systems, Inc.）对定量 HCV-RNA 呈阴性的样本进行重新测试。 根据 Stuyver 等人，（1993；Inno-LIPA HCVII，Immunogenetics）进行 HCV 基因分型。

将通过 4 种方法监测 PPC（或安慰剂）的依从性：患者日记、药物药丸计数和每月尿液分析是否存在核黄素标记物。 患者每天将摄入 60 毫克核黄素。 核黄素迅速从尿液中排出，在紫外线灯下会发出荧光。 此外，二亚油酰磷脂酰胆碱（DLPC，PPC 的主要磷脂酰胆碱种类）血液水平的抽查将验证合规性。

将通过 3 种方法监测酒精摄入量：患者日记、附带病史和每月血液检测酒精消耗指标（碳水化合物缺乏转铁蛋白）(CDT)。

肝活检在 3 年末进行，标本由不知道患者身份和治疗方案的两名病理学家分析。 纤维化是主要标准，在其他领域进行一些评估，例如在饮酒者和非饮酒者中检查病毒学反应。

1. 纤维化：主要统计分析将比较 PPC 组和安慰剂组纤维化评分从基线到治疗 36 个月后的值的变化。 主要纤维化终点是根据 Ishak 等人 (1995) 对肝活检分级的纤维化程度的组织学终点。 此外，我们还计算了表达星状细胞（Reeves 等人，1996）的α-平滑肌肌动蛋白 (SMA) 的数量，这是主要的胶原蛋白生成细胞。 星状细胞的激活及其向肌成纤维细胞样细胞的转化已在实验性纤维化中得到证实（Mak 等人，1984 年，1994 年）。 平滑肌肌动蛋白 α 是一种典型的平滑肌细胞肌动蛋白亚型 (Skalli 等人，1986)，可能位于人类肝脏的星状细胞中。 它在星状细胞中的表达被认为是星状细胞向肌成纤维细胞的表型调节的指示。 在人类肝脏中，平滑肌肌动蛋白 α 的出现与肝纤维化过程（Reeves 等人，1996）和肝硬化结节的形成（Nouchi 等人，1991）密切相关。 此外，胶原蛋白或细胞外基质 (ECM) 的其他成分的循环分解产物正被用作肝脏病理学的标志物。 这些包括层粘连蛋白，基底膜的主要非胶原糖蛋白。 事实上，细胞外基底膜会经历连续的更新，层粘连蛋白的升高已在酒精性肝病患者的血清中得到描述（Niemelä 等人，1988 年；Sato 等人，1986 年）。 Tenascin，一种在增殖的 ECM 中表达的分子，TIMP-1，一种基质降解金属蛋白酶 (MMP) 的抑制剂，IV 型胶原蛋白，VI 型胶原蛋白，一种在大胶原原纤维之间形成细丝的分子，III 型前胶原的 N 端前肽 (PIIINP) )，被认为是纤维发生的标志物，透明质酸 (HA)，一种普遍存在的糖胺聚糖，被肝窦内皮和 MMP-2 高提取。 所有这些以前都被评估为纤维化的标志物，一些特别是慢性丙型肝炎患者（Kasahara 等人，1997 年；McHutchison 等人，2000 年；Kojima 等人，2001 年；Murawaki 等人，2001 年）也是饮酒者。
2. 持续病毒学反应，定义为抗病毒治疗完成后至少 24 周内血浆 HCV RNA 消失。