肝细胞移植治疗苯丙酮尿症

可能需要来自多个供体的肝细胞来提供足够数量的细胞用于移植以纠正疾病过程。 我们之前曾估计，接受者的肝脏质量接近 4 x 10 到第 9 次方肝细胞/kg。 然而，这只是一个估计，真实质量可能是这个数字的两倍。 我们的目标是尝试注入至少 2x10 到第 8 电池/公斤。 一旦确定肝细胞符合 IND 释放标准，患者将接受调强放射治疗 (IMRT)，并开始肝细胞移植。

准备性肝脏照射：使用基于线性加速器的立体定向放射外科系统和调强放射治疗，将对占整个肝脏体积 35-50% 的右肝叶的一部分进行单次照射，剂量为 10 Gy计划（IMRT）。 呼吸门控将用于进一步提高将剂量输送到指定体积并限制对邻近组织的暴露的准确性。 肝脏照射后，右侧或主门静脉将被短暂（0-90 分钟）阻塞，以向供体肝细胞提供代偿性有丝分裂信号。 瞬时门静脉阻塞或栓塞已在灵长类动物中显示，可提供供体细胞增殖所需的适当有丝分裂信号。 届时，供体肝细胞将被移植到受体肝脏的照射部位。

每个供体肝脏的输注次数将取决于患者对输注的耐受性（避免门静脉血栓形成和门静脉到全身静脉系统的分流），以及供体肝细胞的活力。 来自每个供体肝脏的肝细胞将每 6 到 8 小时输注三到四次，直到细胞不再有活力，大约在初始准备后二十四小时。 理想情况下，输液导管将保持在脐静脉残余的门静脉循环之外，这样患者就可以出院，直到下一个供肝可用。 由于根据我们的经验，我们还不知道移植所需的细胞数量以改善功能从而治愈代谢性疾病，因此我们将在供体可用时继续输注肝细胞，直到达到肝细胞的目标体积和存活能力细胞已过期。 使用来自多个捐赠者的肝细胞将有助于确保注入足够数量的细胞，同时将门静脉压力保持在正常范围内。Phe 水平将由受试者每周收集一次，使用新生儿筛查滤纸上的毛细血管血样，并邮寄给卫生防护中心。 Phe 水平也将每月收集在静脉样本中。 在安排随访的几个月内，将收集静脉和毛细血管样本。

受试者将通过匹兹堡 UPMC 儿童医院医学遗传学研究营养师在移植后接受仔细的饮食观察。 为期六个月的三天饮食记录将每月完成一次，之后每三个月完成一次。 在整个研究过程中饮食应保持不变，除非研究人员指示。

受试者将在移植后 6、12 和 24 个月（访问 4 和 6 以及研究访问结束）接受重复的神经心理学评估，将其与移植前获得的结果进行比较以确定评估评分的改善是否与移植程序。

在最后一次肝细胞输注后的每次随访中，将进行全身 Phe 氧化的同位素监测。 如果怀疑存在移植物排斥反应，还可以完成额外的 Phe 氧化测试。

肝活检将在移植后 3 个月和 12 个月进行，以评估供体肝细胞的存在，并可能在怀疑移植排斥反应的情况下完成。