Leberzelltransplantation bei Phenylketonurie

Hepatozyten von mehr als einem Spender können erforderlich sein, um eine ausreichende Anzahl von Zellen für die Transplantation bereitzustellen, um den Krankheitsprozess zu korrigieren. Wir haben zuvor geschätzt, dass sich die Lebermasse eines Empfängers 4 x 10 hoch 9 Hepatozyten/kg nähert. Dies ist jedoch nur eine Schätzung, und die wahre Masse kann doppelt so hoch sein. Unser Ziel ist es, zu versuchen, mindestens 2x10 bis 8 Powerzellen/kg zu infundieren. Sobald festgestellt wurde, dass die IND-Freigabekriterien für die Hepatozyten erfüllt sind, erhält der Patient eine intensitätsmodulierte Strahlentherapie (IMRT) und die Hepatozytentransplantation beginnt.

Präparative Leberbestrahlung: Ein Teil des rechten Leberlappens, der zwischen 35 und 50 % des gesamten Lebervolumens ausmacht, wird mit einer Dosis von 10 Gy in einer einzelnen Fraktion unter Verwendung eines linearbeschleunigerbasierten stereotaktischen Radiochirurgiesystems mit intensitätsmodulierter Strahlentherapie bestrahlt Planung (IMRT). Respiratory Gating wird verwendet, um die Genauigkeit der Abgabe der Dosis auf ein bestimmtes Volumen weiter zu erhöhen und die Exposition gegenüber angrenzenden Geweben zu begrenzen. Nach der Leberbestrahlung wird die rechte oder Hauptportalvene vorübergehend (0–90 min) verschlossen, um Spenderhepatozyten ein kompensatorisches mitotisches Signal zu liefern. Bei Primaten wurde gezeigt, dass ein vorübergehender Verschluss oder eine Embolisation der Pfortader die geeigneten mitotischen Signale bereitstellt, die für die Proliferation von Spenderzellen erforderlich sind. Zu diesem Zeitpunkt werden Spender-Hepatozyten in den bestrahlten Teil der Leber des Empfängers transplantiert.

Die Anzahl der Infusionen von jeder Spenderleber hängt von der Infusionstoleranz des Patienten (Vermeidung von Pfortaderthrombose und Shunts von der Pfortader zum systemischen Venensystem) und der Lebensfähigkeit der Spenderhepatozyten ab. Die Hepatozyten aus jeder Spenderleber werden über drei bis vier Infusionen alle 6 bis 8 Stunden verabreicht, bis die Zellen etwa 24 Stunden nach der anfänglichen Präparation nicht mehr lebensfähig sind. Idealerweise wird der Infusionskatheter knapp außerhalb des Pfortaderkreislaufs im Nabelvenenrest gehalten, sodass der Patient möglicherweise aus dem Krankenhaus entlassen werden kann, bis die nächste Spenderleber verfügbar ist. Da wir aus unserer Erfahrung noch nicht wissen, wie viele Zellen für eine Transplantation benötigt werden, um die Funktion zu verbessern und eine Stoffwechselerkrankung zu heilen, werden wir weiterhin Hepatozyten infundieren, sobald Spender verfügbar werden, bis das Zielvolumen an Hepatozyten erreicht und lebensfähig ist Zellen ist abgelaufen. Die Verwendung von Hepatozyten von mehreren Spendern trägt dazu bei, sicherzustellen, dass eine ausreichende Anzahl von Zellen infundiert wird, während der Pfortaderdruck im normalen Bereich gehalten wird. Die Phe-Werte werden einmal pro Woche vom Probanden unter Verwendung einer Kapillarblutprobe auf einem Neugeborenen-Screening-Filterpapier gesammelt. und an CHP geschickt. Die Phe-Werte werden auch monatlich in einer venösen Probe erfasst. In den Monaten, in denen ein Nachsorgetermin geplant ist, werden sowohl eine venöse als auch eine kapillare Probe entnommen.

Die Probanden erhalten nach der Transplantation eine sorgfältige diätetische Beobachtung durch den Ernährungswissenschaftler der UPMC Children's Hospital of Pittsburgh Division of Medical Genetics. Die dreitägigen Ernährungsaufzeichnungen werden sechs Monate lang einmal im Monat und danach alle drei Monate durchgeführt. Die Ernährung sollte während der gesamten Studie unverändert bleiben, sofern nicht vom Studienpersonal angeordnet.

Die Probanden werden 6, 12 und 24 Monate nach der Transplantation (Besuche 4 und 6 und der Besuch am Ende der Studie) einer wiederholten neuropsychologischen Bewertung unterzogen, die mit den vor der Transplantation erzielten Ergebnissen verglichen wird, um festzustellen, ob eine Verbesserung der Bewertungsbewertung damit verbunden ist das Transplantationsverfahren.

Eine Isotopenüberwachung der Ganzkörper-Phe-Oxidation wird bei jedem Folgebesuch nach der letzten Hepatozyteninfusion durchgeführt. Bei Verdacht auf Transplantatabstoßung kann auch ein zusätzlicher Phe-Oxidationstest durchgeführt werden.

Leberbiopsien werden 3 und 12 Monate nach der Transplantation durchgeführt, um das Vorhandensein von Spenderhepatozyten festzustellen, und können im Falle einer vermuteten Transplantatabstoßung durchgeführt werden.