Трансплантация клеток печени при фенилкетонурии

Гепатоциты от более чем одного донора могут потребоваться, чтобы обеспечить достаточное количество клеток для трансплантации для коррекции патологического процесса. Ранее мы подсчитали, что масса печени реципиента приближается к 4 х 10 гепатоцитов/кг в 9-й степени. Однако это всего лишь оценка, и истинная масса может быть вдвое больше. Наша цель состоит в том, чтобы попытаться влить не менее 2x10 до 8 клеток/кг. Как только будет определено, что критерии высвобождения IND для гепатоцитов соблюдены, пациенту будет проведена лучевая терапия с модулированной интенсивностью (IMRT), и начнется трансплантация гепатоцитов.

Предварительное облучение печени: часть правой доли печени, составляющую 35-50% всего объема печени, облучают до дозы 10 Гр за одну фракцию с использованием стереотаксической радиохирургической системы на основе линейного ускорителя с лучевой терапией с модулированной интенсивностью. планирование (IMRT). Дыхательный вентиль будет использоваться для дальнейшего повышения точности доставки дозы до заданного объема и ограничения воздействия на соседние ткани. После облучения печени правая или основная воротная вена временно (0-90 мин) перекрывается, чтобы обеспечить компенсаторный митотический сигнал донорским гепатоцитам. Было показано, что временная окклюзия воротной вены или эмболизация у приматов обеспечивают соответствующие митотические сигналы, необходимые для пролиферации донорских клеток. В это время донорские гепатоциты будут трансплантированы в облученную часть печени реципиента.

Количество инфузий от каждой донорской печени будет зависеть от переносимости пациентом инфузии (предотвращение тромбоза воротной вены и шунтирования воротной вены в системную венозную систему) и жизнеспособности донорских гепатоцитов. Гепатоциты из каждой донорской печени будут вводиться в течение трех-четырех инфузий каждые 6-8 часов, пока клетки не перестанут быть жизнеспособными, примерно через двадцать четыре часа после первоначальной подготовки. В идеале инфузионный катетер должен располагаться сразу за портальным кровообращением в остатке пупочной вены, чтобы пациента можно было потенциально выписать из больницы до тех пор, пока не появится следующая донорская печень. Поскольку из нашего опыта мы еще не знаем, сколько клеток необходимо для трансплантации, чтобы улучшить функцию и вылечить метаболическое заболевание, мы будем продолжать переливать гепатоциты по мере появления доноров до достижения целевого объема гепатоцитов и до жизнеспособности клеток. срок действия ячеек истек. Использование гепатоцитов от нескольких доноров поможет обеспечить инфузию адекватного количества клеток при поддержании портального давления в нормальном диапазоне. Уровни Phe будут собираться субъектом один раз в неделю с использованием образца капиллярной крови на фильтровальной бумаге для скрининга новорожденных, и отправлены на ТЭЦ. Уровни Phe также будут ежемесячно собираться в венозном образце. В течение нескольких месяцев, когда запланировано последующее посещение, будет взят образец как венозной, так и капиллярной крови.

Субъекты будут получать тщательное диетическое наблюдение после трансплантации с помощью диетолога-исследователя отдела медицинской генетики UPMC Children's Hospital of Pittsburgh. Записи трехдневной диеты будут производиться один раз в месяц в течение шести месяцев, а затем каждые три месяца. Диета должна оставаться неизменной на протяжении всего исследования, если только это не предписано исследовательским персоналом.

Субъекты будут проходить повторную нейропсихологическую оценку через 6, 12 и 24 месяца после трансплантации (визиты 4 и 6 и визит в конце исследования), которые будут сравниваться с результатами, полученными до трансплантации, чтобы определить, связано ли улучшение оценки с процедура трансплантации.

Изотопный мониторинг окисления Phe всего организма будет проводиться при каждом последующем посещении после последней инфузии гепатоцитов. В случае подозрения на отторжение трансплантата также может быть выполнен дополнительный тест на окисление Phe.

Биопсия печени будет проводиться через 3 и 12 месяцев после трансплантации для оценки наличия донорских гепатоцитов и может быть выполнена в случае подозрения на отторжение трансплантата.