Transplantace jaterních buněk pro fenylketonurii

Hepatocyty od více než jednoho dárce mohou být vyžadovány k poskytnutí dostatečného počtu buněk pro transplantaci ke korekci chorobného procesu. Již dříve jsme odhadli, že hmotnost jater příjemce se blíží 4 x 10 až 9. mocnině hepatocytů/kg. Je to však jen odhad a skutečná hmotnost může být dvojnásobkem tohoto čísla. Naším cílem je pokusit se napustit alespoň 2x10 až 8. silových článků/kg. Jakmile bylo stanoveno, že byla splněna kritéria pro uvolňování IND pro hepatocyty, pacient poté podstoupí radiační terapii s modulovanou intenzitou (IMRT) a transplantace hepatocytů bude zahájena.

Preparativní ozáření jater: Část pravého jaterního laloku zahrnující 35–50 % celkového objemu jater bude ozářena dávkou 10 Gy v jedné frakci pomocí stereotaktického radiochirurgického systému na bázi lineárního urychlovače s radiační terapií s modulovanou intenzitou. plánování (IMRT). Respirační hradlování bude použito k dalšímu zvýšení přesnosti podání dávky na stanovený objem a omezení expozice sousedním tkáním. Po ozáření jater bude pravá nebo hlavní portální žíla přechodně uzavřena (0-90 min), aby poskytla kompenzační mitotický signál dárcovským hepatocytům. Ukázalo se, že přechodná okluze nebo embolizace portální žíly u primátů poskytuje vhodné mitotické signály nezbytné pro proliferaci dárcovských buněk. V té době budou dárcovské hepatocyty transplantovány do ozářené části jater příjemce.

Počet infuzí z jater každého dárce bude záviset na toleranci pacienta k infuzi (zabránění trombóze portální žíly a posunu portální žíly do systémového žilního systému) a životaschopnosti dárcovských hepatocytů. Hepatocyty z jater každého dárce budou podávány ve třech až čtyřech infuzích každých 6 až 8 hodin, dokud buňky přestanou být životaschopné, přibližně dvacet čtyři hodin po počáteční přípravě. V ideálním případě bude infuzní katétr udržován těsně mimo portální cirkulaci ve zbytku pupeční žíly, takže pacient může být potenciálně propuštěn z nemocnice, dokud nebudou k dispozici další dárcovská játra. Vzhledem k tomu, že z našich zkušeností zatím neznáme počet buněk potřebných k transplantaci, aby se zlepšila funkce a vyléčilo se metabolické onemocnění, budeme pokračovat v infuzi hepatocytů, jakmile budou dárci k dispozici, dokud nedosáhneme cílového objemu hepatocytů a dokud nebude životaschopnost hepatocytů vypršela platnost buněk. Použití hepatocytů od více dárců pomůže zajistit, aby byl podán dostatečný počet buněk při zachování portálního tlaku v normálním rozmezí. Hladiny Phe budou subjektu shromažďovány jednou týdně pomocí vzorku kapilární krve na novorozeneckém screeningovém filtračním papíru, a zaslány poštou na CHP. Hladiny Phe budou také měsíčně shromažďovány v žilním vzorku. Během měsíců, kdy je plánována následná návštěva, bude odebrán venózní i kapilární vzorek.

Subjekty budou po transplantaci pečlivě sledovány dietou prostřednictvím dietologa UPMC Children's Hospital of Pittsburgh Division of Medical Genetics. Třídenní dietní záznamy se budou provádět jednou měsíčně po dobu šesti měsíců a poté každé tři měsíce. Dieta by měla zůstat nezměněna po celou dobu studie, pokud to nenařídí studijní personál.

Subjekty podstoupí opakované neuropsychologické vyšetření 6, 12 a 24 měsíců po transplantaci (návštěva 4 a 6 a konec studijní návštěvy), které bude porovnáno s výsledky získanými před transplantací, aby se určilo, zda je zlepšení v hodnocení spojeno s transplantační postup.

Izotopové monitorování celotělové oxidace Phe bude prováděno při každé následné návštěvě po poslední infuzi hepatocytů. V případě podezření na odmítnutí štěpu lze také provést dodatečný test oxidace Phe.

Jaterní biopsie budou provedeny 3 a 12 měsíců po transplantaci, aby se vyhodnotila přítomnost dárcovských hepatocytů, a mohou být dokončeny v případě podezření na odmítnutí štěpu.