Greffe de cellules hépatiques pour la phénylcétonurie

Les hépatocytes provenant de plus d'un donneur peuvent être nécessaires pour fournir un nombre suffisant de cellules pour la transplantation afin de corriger le processus pathologique. Nous avons précédemment estimé que la masse hépatique d'un receveur approche 4 x 10 puissance 9 hépatocytes/kg. Cependant, ce n'est qu'une estimation et la masse réelle peut être le double de ce nombre. Notre objectif est d'essayer d'infuser au moins 2x10 à la 8ème cellule de puissance/kg. Une fois qu'il a été déterminé que les critères de libération de l'IND pour les hépatocytes ont été remplis, le patient recevra alors une radiothérapie à modulation d'intensité (IMRT) et la greffe d'hépatocytes commencera.

Irradiation préparatoire du foie : une partie du lobe hépatique droit comprenant entre 35 et 50 % du volume total du foie sera irradiée à une dose de 10 Gy en une seule fraction à l'aide d'un système de radiochirurgie stéréotaxique basé sur un accélérateur linéaire avec radiothérapie à modulation d'intensité. planification (IMRT). La synchronisation respiratoire sera utilisée pour augmenter encore la précision de l'administration de la dose à un volume spécifié et limiter l'exposition aux tissus adjacents. Après irradiation hépatique, la veine porte droite ou principale sera occluse de manière transitoire (0-90 min) pour fournir un signal mitotique compensatoire aux hépatocytes du donneur. Il a été démontré que l'occlusion ou l'embolisation transitoire de la veine porte chez les primates fournit les signaux mitotiques appropriés nécessaires à la prolifération des cellules du donneur. À ce moment-là, les hépatocytes du donneur seront transplantés dans la partie irradiée du foie du receveur.

Le nombre de perfusions de chaque foie de donneur dépendra de la tolérance du patient à la perfusion (évitement de la thrombose de la veine porte et du shunt de la veine porte au système veineux systémique) et de la viabilité des hépatocytes du donneur. Les hépatocytes de chaque foie de donneur seront administrés en trois à quatre perfusions, toutes les 6 à 8 heures, jusqu'à ce que les cellules ne soient plus viables, environ vingt-quatre heures après la préparation initiale. Idéalement, le cathéter de perfusion sera maintenu juste à l'extérieur de la circulation porte dans le reliquat de la veine ombilicale afin que le patient puisse potentiellement sortir de l'hôpital jusqu'à ce que le foie du prochain donneur soit disponible. Comme nous ne connaissons pas encore par expérience le nombre de cellules nécessaires à la greffe afin d'améliorer la fonction pour qu'une maladie métabolique soit guérie, nous continuerons à perfuser des hépatocytes au fur et à mesure que les donneurs deviennent disponibles jusqu'à atteindre le volume cible d'hépatocytes et jusqu'à la viabilité de les cellules ont expiré. L'utilisation d'hépatocytes provenant de plusieurs donneurs aidera à garantir qu'un nombre adéquat de cellules est perfusé tout en maintenant la pression portale dans la plage normale. Les niveaux de Phe seront collectés une fois par semaine par le sujet, à l'aide d'un échantillon de sang capillaire sur un papier filtre de dépistage néonatal, et envoyé par la poste au CHP. Les niveaux de Phe seront également recueillis dans un échantillon veineux mensuel. Pendant les mois où une visite de suivi est prévue, un échantillon veineux et capillaire sera prélevé.

Les sujets feront l'objet d'une observation diététique attentive après la greffe par l'intermédiaire du diététicien de recherche en génétique médicale de l'Hôpital pour enfants de l'UPMC de Pittsburgh. Des enregistrements de régime de trois jours seront remplis une fois par mois pendant six mois, puis tous les trois mois par la suite. Le régime alimentaire doit rester inchangé tout au long de l'étude, sauf indication contraire du personnel de l'étude.

Les sujets subiront une nouvelle évaluation neuropsychologique à 6, 12 et 24 mois après la greffe (visites 4 et 6 et la visite de fin d'étude) qui sera comparée aux résultats obtenus avant la greffe pour déterminer si une amélioration de la notation de l'évaluation est associée à la procédure de greffe.

Une surveillance isotopique de l'oxydation de la Phe dans tout le corps sera effectuée à chaque visite de suivi après la dernière perfusion d'hépatocytes. Un test complémentaire d'oxydation de la Phe peut également être réalisé en cas de suspicion de rejet de greffe.

Des biopsies hépatiques seront effectuées à 3 et 12 mois après la greffe pour évaluer la présence d'hépatocytes du donneur, et peuvent être complétées en cas de suspicion de rejet de greffe.