Przeszczep komórek wątroby w przypadku fenyloketonurii

Hepatocyty od więcej niż jednego dawcy mogą wymagać dostarczenia wystarczającej liczby komórek do przeszczepu w celu skorygowania procesu chorobowego. Wcześniej oszacowaliśmy, że masa wątroby biorcy zbliża się do 4 x 10 hepatocytów do potęgi 9/kg. Jest to jednak tylko oszacowanie, a rzeczywista masa może być dwukrotnie większa. Naszym celem jest próba infuzji co najmniej 2x10 do ósmej potęgi/kg. Po ustaleniu, że kryteria uwalniania IND dla hepatocytów zostały spełnione, pacjent otrzyma radioterapię o modulowanej intensywności (IMRT) i rozpocznie się przeszczep hepatocytów.

Preparatywne napromieniowanie wątroby: Część prawego płata wątroby obejmująca od 35 do 50% całej objętości wątroby zostanie napromieniowana dawką 10 Gy w pojedynczej frakcji przy użyciu systemu radiochirurgii stereotaktycznej opartej na akceleratorze liniowym z radioterapią o modulowanej intensywności planowanie (IMRT). Bramkowanie oddechowe zostanie zastosowane w celu dalszego zwiększenia dokładności podania dawki do określonej objętości i ograniczenia narażenia sąsiednich tkanek. Po napromieniowaniu wątroby prawa lub główna żyła wrotna zostanie przejściowo zamknięta (0-90 min), aby zapewnić hepatocytom dawcy kompensacyjny sygnał mitotyczny. Wykazano, że przejściowa okluzja lub embolizacja żyły wrotnej u naczelnych dostarcza odpowiednich sygnałów mitotycznych niezbędnych do proliferacji komórek dawcy. W tym czasie hepatocyty dawcy zostaną przeszczepione do napromienionej części wątroby biorcy.

Liczba infuzji z wątroby każdego dawcy będzie zależała od tolerancji pacjenta na infuzję (unikanie zakrzepicy żyły wrotnej i przecieku żyły wrotnej do układu żylnego układowego) oraz żywotności hepatocytów dawcy. Hepatocyty z wątroby każdego dawcy zostaną podane w trzech do czterech infuzjach, co 6 do 8 godzin, aż komórki przestaną być zdolne do życia, około dwadzieścia cztery godziny po wstępnym przygotowaniu. Idealnie byłoby, gdyby cewnik infuzyjny był utrzymywany tuż poza krążeniem wrotnym w resztce żyły pępowinowej, tak aby pacjent mógł zostać potencjalnie wypisany ze szpitala do czasu, aż dostępna będzie wątroba następnego dawcy. Ponieważ nie znamy jeszcze z naszego doświadczenia liczby komórek potrzebnych do przeszczepu w celu poprawy funkcji i wyleczenia choroby metabolicznej, będziemy kontynuować infuzję hepatocytów w miarę pojawiania się dawców, aż do osiągnięcia docelowej objętości hepatocytów i żywotności komórki wygasły. Wykorzystanie hepatocytów od wielu dawców pomoże zapewnić infuzję odpowiedniej liczby komórek przy jednoczesnym utrzymaniu ciśnienia wrotnego w normalnym zakresie. Poziom Phe będzie pobierany przez pacjenta raz w tygodniu, przy użyciu próbki krwi włośniczkowej na bibule filtracyjnej do badań przesiewowych noworodków, i wysłane do CHP. Poziomy Phe będą również zbierane w próbce żylnej co miesiąc. W miesiącach, w których planowana jest wizyta kontrolna, zostanie pobrana zarówno próbka żylna, jak i włośniczkowa.

Pacjenci będą poddawani starannej obserwacji dietetycznej po przeszczepie przez dietetyka badawczego UPMC Children's Hospital of Pittsburgh Division of Medical Genetics. Trzydniowe zapisy diety będą uzupełniane raz w miesiącu przez sześć miesięcy, a następnie co trzy miesiące. Dieta powinna pozostać niezmieniona przez całe badanie, chyba że zaleci to personel prowadzący badanie.

Pacjenci zostaną poddani powtórnej ocenie neuropsychologicznej po 6, 12 i 24 miesiącach po przeszczepie (Wizyty 4 i 6 oraz Wizyta kończąca badanie), która zostanie porównana z wynikami uzyskanymi przed przeszczepem w celu ustalenia, czy poprawa punktacji oceny jest związana z procedurę przeszczepu.

Monitorowanie izotopowe utleniania Phe całego organizmu będzie wykonywane podczas każdej wizyty kontrolnej po ostatniej infuzji hepatocytów. W przypadku podejrzenia odrzucenia przeszczepu można również wykonać dodatkowy test utleniania Phe.

Biopsje wątroby zostaną wykonane 3 i 12 miesięcy po przeszczepie w celu oceny obecności hepatocytów dawcy i mogą zostać wykonane w przypadku podejrzenia odrzucenia przeszczepu.