Levercellstransplantation för fenylketonuri

Hepatocyter från mer än en donator kan behövas för att tillhandahålla tillräckligt antal celler för transplantation för att korrigera sjukdomsprocessen. Vi har tidigare uppskattat att en mottagares levermassa närmar sig 4 x 10 till 9:e potensen hepatocyter/kg. Detta är dock bara en uppskattning och den verkliga massan kan vara dubbelt så mycket. Vårt mål är att försöka infundera minst 2x10 till 8:e kraftceller/kg. När det har fastställts att IND-frisättningskriterierna för hepatocyterna har uppfyllts, kommer patienten att få Intensity-Modulated Radiation Therapy (IMRT), och hepatocyttransplantationen kommer att påbörjas.

Preparativ leverbestrålning: En del av den högra leverloben som omfattar mellan 35-50 % av hela levervolymen kommer att bestrålas till en dos av 10 Gy i en enda fraktion med hjälp av ett linjäracceleratorbaserat stereotaktisk strålkirurgisystem med intensitetsmodulerad strålbehandling planering (IMRT). Respiratorisk gating kommer att användas för att ytterligare öka noggrannheten för att leverera dosen till en specificerad volym och begränsa exponeringen för intilliggande vävnader. Efter leverbestrålning kommer den högra eller huvudsakliga portvenen att tilltäppas tillfälligt (0-90 min) för att ge en kompensatorisk mitotisk signal till donatorhepatocyter. Övergående portvenocklusion eller embolisering har hos primater visats ge de lämpliga mitotiska signaler som är nödvändiga för donatorcellsproliferation. Vid den tidpunkten kommer donatorhepatocyter att transplanteras in i den bestrålade delen av mottagarens lever.

Antalet infusioner från varje donatorlever kommer att bero på patientens tolerans mot infusion (undvikande av portalventrombos och shunting av portalven till systemiskt vensystem) och viabiliteten hos donatorhepatocyter. Hepatocyterna från varje donatorlever kommer att ges under tre till fyra infusioner, var 6:e ​​till 8:e timme, tills cellerna inte längre är livskraftiga, cirka tjugofyra timmar efter den första beredningen. Helst kommer infusionskatetern att hållas precis utanför portalcirkulationen i navelvensresten så att patienten eventuellt kan skrivas ut från sjukhuset tills nästa donatorlever är tillgänglig. Eftersom vi ännu inte vet av vår erfarenhet hur många celler som behövs för transplantation för att förbättra funktionen så att en metabol sjukdom botas, kommer vi att fortsätta att infundera hepatocyter när donatorer blir tillgängliga tills vi når målvolymen för hepatocyter och tills viabiliteten av celler har gått ut. Användning av hepatocyter från flera donatorer kommer att bidra till att säkerställa att ett tillräckligt antal celler infunderas samtidigt som portaltrycket bibehålls inom det normala intervallet. Phe-nivåer kommer att samlas in en gång i veckan av försökspersonen, med hjälp av ett kapillärblodprov på ett nyföddscreeningsfilterpapper, och skickas till CHP. Phe-nivåer kommer också att samlas in i ett venöst prov varje månad. Under månader då ett uppföljningsbesök är planerat, kommer både ett venöst och kapillärt prov att tas.

Försökspersonerna kommer att få noggrann kostobservation efter transplantation genom UPMC Children's Hospital of Pittsburgh Division of Medical Genetics research dietist. Tre-dagars dietposter kommer att slutföras en gång i månaden i sex månader, sedan var tredje månad därefter. Dieten bör förbli oförändrad under hela studien, såvida inte studiepersonalen instruerar det.

Försökspersonerna kommer att genomgå en upprepad neuropsykologisk bedömning 6, 12 och 24 månader efter transplantationen (besök 4 och 6 och studiebesökets slut) som kommer att jämföras med resultat som erhållits före transplantation för att avgöra om en förbättring av bedömningspoängen är förknippad med transplantationsproceduren.

Isotopövervakning av hela kroppen Phe-oxidation kommer att utföras vid varje uppföljningsbesök efter den sista hepatocytinfusionen. Ett ytterligare Phe-oxidationstest kan också genomföras vid misstänkt transplantatavstötning.

Leverbiopsier kommer att utföras 3 och 12 månader efter transplantationen för att bedöma förekomsten av donatorhepatocyter, och kan slutföras vid misstänkt transplantatavstötning.