自闭症谱系障碍的亚叶酸干预

针对自闭症谱系障碍 (ASD) 的循证干预措施有限。 目前，没有 FDA 批准的药物疗法可以解决核心 ASD 症状或与 ASD 相关的病理生理过程。 例如，FDA 批准的两种用于治疗 ASD 的抗精神病药物适用于与 ASD 相关的症状，而不是核心 ASD 症状。 基于强有力的初步证据，本研究旨在用亚叶酸改善核心 ASD 症状。 本研究提出并研究了两种对干预作出反应的生物学机制。

叶酸是正常神经发育所需的必需 B 族维生素。 亚叶酸是叶酸的一种还原形式，在一项开放标签研究和大型病例系列研究中显示，它可以改善与 ASD 相关的代谢和核心症状。 本研究将扩展这一初步证据，以双盲安慰剂对照方式证明亚叶酸的临床疗效，同时评估与临床反应相关的生物学机制。

亚叶酸功效的初步证据有两方面：首先，几项独立研究表明，亚叶酸干预可改善被诊断为脑叶酸缺乏症的 ASD 患者的 ASD 核心症状 - 一种代谢紊乱，其中运输叶酸的主要途径穿过血脑屏障的叶酸功能失调。 叶酸穿过血脑屏障的主要转运途径使用叶酸受体 α (FRα) 和能量依赖性内吞作用。 次要途径，即还原叶酸载体 (RFC)，可以将还原形式的叶酸（例如亚叶酸）转运穿过血脑屏障。 在患有 ASD 和大脑叶酸缺乏症的儿童系列病例中，亚叶酸（0.5 至 2 mg/kg/天）改善了一些 (3-6) 的沟通、社交、注意力和刻板行为，并完全改善了其他人的 ASD 症状(6, 7)。

脑叶酸缺乏的主要原因是一种自身抗体，它与 FRα 结合并干扰其结合和转运叶酸的能力。 最近，Frye 等人。发现 (a) 大约 75% 的 ASD 儿童存在针对 FRα 的自身抗体，以及 (b) 对患有 ASD 和 FRα 自身抗体的儿童进行亚叶酸（2mg/kg/天；最大 50mg）干预导致显着改善与在相似时间段内未接受任何干预的儿童（等待组）的父母评级相比，父母对接受性和表达性语言、口头交流、刻板行为和注意力的评级。 该提案将通过以双盲安慰剂对照方式记录对亚叶酸干预的反应来扩展这些初步发现，并测试 FRα 自身抗体滴度是否预测对亚叶酸干预的反应。 如果发现 FRα 自身抗体滴度可以预测对干预的反应，那么这种滴度可以提供一种生物标志物来识别可能受益于亚叶酸干预的 ASD 儿童子集，甚至可以预测高危兄弟姐妹在治疗期间出现 ASD 症状。症状前期。

其次，还原氧化型谷胱甘肽 (GSH/GSSG) 的比率是衡量全身氧化还原状态和氧化应激的既定指标，三项独立的病例对照研究表明，许多 ASD 儿童的这一比率显着降低。 詹姆斯等人。在一项为期 3 个月的开放标签临床试验中表明，亚叶酸和甲基 B12 的干预显着改善了 ASD 儿童表达语言、接受语言和社交的 GSH/GSSG 和 Vineland 分数。 重要的悬而未决的问题是（a）是否可以在更大规模的双盲安慰剂对照研究中证实这一初步数据，（b）亚叶酸干预前的氧化还原状态是​​否可以预测对干预的反应，以及（c）是否改善全身氧化还原状态与核心 ASD 症状的改善有关。

本研究将在双盲安慰剂对照临床试验中评估亚叶酸干预是否可以改善 ASD 的核心症状（即沟通、社交、刻板动作）和相关的共病症状（即注意力）。 本研究将解决与干预相关的核心 ASD 症状的改善是否与拟受干预影响的任一（或两者）生物学机制的生物标志物相关（即 GSH/GSSG、FRα 自身抗体滴度）。 因此，使用这些生物标志物，有可能在诊断后早期甚至在症状出现前阶段很容易地识别出对亚叶酸干预反应最佳的 ASD 儿童。

这项双盲、安慰剂对照 (DBPC) 研究将评估亚叶酸治疗 3-14 岁语言障碍自闭症谱系障碍患者的疗效。 该研究将包括一个单点试验，大约 48 个进入 DBPC 阶段。 受试者将是男性或女性，目前或预期诊断为自闭症谱系障碍 (ASD)。 语言障碍将由 CELF 或 PLS 在必要时进行定义。

第一阶段将包括大约 57 名 3-14 岁被诊断为自闭症谱系障碍（根据自闭症诊断观察时间表或自闭症诊断访谈修订版定义）的儿童，直到大约 48 名确诊为 ASD 的儿童被纳入随机对照试验（随机对照试验；第 2 阶段）。 招生将根据需要继续进行，直到大约 43 人完成第 2 阶段。大约 40 人将进入第 3 阶段。

将进行初步分析以检查数据是否存在错误、不一致和不完整的信息。 这将包括使用单变量数据的简单频率表和点图以及双变量和多变量数据的散点图和多路点图来检查数据。 为了总结预测变量之间以及预测变量与结果之间的双变量关系，将使用 Spearman 等级相关系数。 对于报告推论统计，回归系数和 95% 置信区间将被广泛用于量化临床重要性的程度。

主要人群将是意向治疗 (ITT) 人群，定义为所有已完成至少一项治疗后主要结果测量的受试者。 将对“接受治疗”人群进行二次分析，该人群定义为至少 75% 遵守处方药且未显着偏离方案的受试者。

为了确定为期 12 周的亚叶酸干预是否改善了第 2 阶段自闭症谱系障碍的核心症状，将使用 SAS 中的 Proc Mixed 程序来拟合协方差的混合模型分析。 对于多站点研究，具有响应变量语言评估的完整模型将包括预测因子，例如：干预、时间、自身抗体、按时间相互作用的干预、按干预相互作用的自身抗体、氧化还原状态、按时间相互作用的氧化还原状态和基线协变量。 然而，对于单点研究，由于样本量较小，模型中的变量数量将受到限制，并且将对亚组进行单独的模型以比较各个亚组的治疗效果。 混合模型的结果将确定生理异常的生物标志物，包括自身抗体和氧化还原状态，是否可以预测干预反应。 将对次要结果进行类似的分析。