CD133 和微卫星状态在评估直肠乙状结肠癌青年接受新辅助治疗中的作用

世界范围内结直肠癌的发病年龄均在50岁以上，但比较西方国家和资源有限国家如埃及的结直肠癌发病率和临床病理特征，发病年龄中位数明显偏低。 在埃及，报告显示在接受结肠镜检查的患者中有 11-15% 检测出 CRC，在 40 岁或以下的患者中有 29-31% 被确诊。 类似的数据来自亚洲其他人口稠密、资源匮乏的国家。 这种早发直肠癌主要是低分化、晚期预后、散发性，无家族倾向。微卫星高（MSI-h）近端结肠癌的年轻患者预后良好，但缺乏关于这些因素的预后和预测作用的数据受过照射的直肠癌年轻患者的基因。 由于这些年轻患者在无进展生存期和转移事件发生率方面表现出更差的结果，我们假设结直肠癌干细胞 (CR-CSC) 可能在这种令人沮丧的结果中发挥作用。CD133 是最具特征的细胞之一作为 CR-CSCs 的标志物，许多研究表明 CD133 表达与结直肠癌的生存、复发、转移和化疗耐药相关。

因此，该研究试图建立 MS 状态与 CR-CSC 富集之间的相关性，以及这种拟议的关系是否可能对疾病结果和治疗结果有影响。

患者和方法：

研究人员将招募约 30 名患者，并将检查治疗前结肠镜活检

• 用苏木精和伊红染色后，光镜下的癌类型和分级。

• 使用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶技术对石蜡块的 4 µ 厚切片进行免疫细胞化学。 切片将常规脱石蜡，通过分级醇再水化为蒸馏水。 脱石蜡切片用 0.3% 过氧化氢处理 10 分钟。 将进行合适的抗原修复。 将应用封闭血清 10 分钟。 切片将与针对

  1. MMR 蛋白：MLH1、MSH2 或 MSH6、PMS-2。
  2. CD133。 然后，研究者将从接受新辅助放化疗和接受手术的同一患者身上收集块，并检查
  1. 染色后在光镜下： 癌的类型和等级 血管浸润 免疫反应程度 浸润模式和深度 淋巴结状态。
  2. CD 133 阳性细胞计数与先前报道的技术相同。 所产生的免疫复合物将按照试剂盒附带的说明通过通用染色试剂盒进行检测。 载玻片将在磷酸盐缓冲盐水中洗涤数次，并且在每个步骤之间将在其中放置 5 分钟，除了在过氧化物酶试剂之后，洗涤将通过蒸馏水进行。 每个染色系列中将包括阴性和阳性对照。 免疫组织化学评估将根据 Ren F 等人和 Zhang X 等人进行。 将使用数码相机系统获得数码图像