Role CD133 a stavu mikrosatelitů při hodnocení rektosigmoidního karcinomu u mladých dospělých léčených neoadjuvantní léčbou

Věková incidence kolorektálního karcinomu je celosvětově nad padesát let. Ale při srovnání incidence a klinickopatologických rysů kolorektálního karcinomu v západních zemích a zemích s omezenými zdroji, jako je Egypt, je významně nižší střední věk výskytu. Zprávy z Egypta ukázaly, že CRC byl detekován u 11–15 % pacientů, kteří podstoupili kolonoskopii, a diagnostikován u 29–31 % pacientů ve věku 40 let nebo mladších. Podobné údaje pocházejí z dalších vysoce zalidněných zemí v Asii s omezenými zdroji. Tento časný karcinom rekta je převážně špatně diferencovaný, pokročilý v prognóze, sporadický bez familiární predispozice. Mladí pacienti s mikrosatelitním vysokým (MSI-h) proximálním karcinomem tlustého střeva mají dobrou prognózu, ale chybí údaje o prognostické a prediktivní roli těchto genů u mladých pacientů s ozářeným karcinomem rekta. Protože tito pacienti v mladém věku vykazují horší výsledky, pokud jde o přežití bez progrese a vyšší míru metastatických příhod, předpokládáme, že v tomto tristním výsledku mohou hrát roli kmenové buňky kolorektálního karcinomu (CR-CSC). CD133 je jedním z nejlépe charakterizovaných markerů CR-CSC, mnoho studií prokázalo, že exprese CD133 korelovala s přežitím, recidivou, metastázami a rezistencí na chemoterapii u kolorektálního karcinomu.

Studie se tedy snaží stanovit korelaci mezi stavem RS a obohacením o CR-CSC a zda tento navrhovaný vztah může mít dopad na výsledek onemocnění a výsledky léčby.

Pacienti a metody:

Vyšetřovatelé zařadí asi 30 pacientů a vyšetří kolonoskopickou biopsii před léčbou

• Typ a stupeň karcinomu pod světelnou mikroskopií po barvení hematoxylinem a eosinem.

• Imunocytochemie byla provedena na 4 µ silných řezech z parafinových bloků s použitím techniky streptavidin-biotin-peroxidázy. Řezy budou běžně deparafinizovány, rehydratovány přes tříděné alkoholy až po destilovanou vodu. Deparafinizované řezy budou ošetřeny 0,3% peroxidem vodíku po dobu 10 minut. Bude provedeno vhodné vyhledání antigenu. Blokující sérum bude aplikováno po dobu 10 minut. Řezy budou inkubovány s protilátkou proti

  1. MMR proteiny: MLH1, MSH2 nebo MSH6,PMS-2.
  2. CD133. Poté vyšetřovatelé shromáždí bloky od stejných pacientů, kteří podstoupili neoadjuvantní chemoradioterapii a podstoupili operaci a vyšetří
  1. Pod světelným mikroskopem po barvení na: Typ a stupeň karcinomu Angiovaskulární invaze Stupeň imunitní odpovědi Vzor a hloubka invaze Stav lymfatických uzlin.
  2. CD 133 pozitivní počet buněk stejnou dříve popsanou technikou . Výsledný imunitní komplex bude detekován univerzální barvicí soupravou podle pokynů přiložených k soupravě. Sklíčka se několikrát promyjí ve fyziologickém roztoku s fosfátovým pufrem a mezi každým krokem se do něj umístí na 5 minut, s výjimkou peroxidázového činidla, které se promyje destilovanou vodou. V každé sérii barvení budou zahrnuty negativní a pozitivní kontroly. Imunohistochemické hodnocení bude provedeno podle Ren F et al a Zhang X et al. Digitální snímky budou pořizovány systémem digitálního fotoaparátu