CD133 og mikrosatellitstatuss rolle i evaluering af rectosigmoid kræft Unge voksne modtog neoadjuverende behandling

Aldersforekomsten af ​​tyktarmskræft er over halvtreds år gammel på verdensplan. Men når man sammenligner forekomsten og de klinisk-patologiske træk ved tyktarmskræft i vestlige lande og lande med begrænsede ressourcer som Egypten, er der en betydelig lavere medianalder for incidens. I Egypten viste rapporter, at CRC blev påvist hos 11-15% af patienterne, der gennemgik koloskopi og diagnosticeret hos 29-31% af patienterne i alderen 40 år eller yngre. Lignende data kommer fra andre meget befolkede ressourcebegrænsede lande i Asien. Denne tidligt opståede endetarmskræft er hovedsageligt dårligt differentieret, fremskreden ved prognose, sporadisk uden familiær disposition. Unge patienter med mikrosatellithøj (MSI-h) proksimal tyktarmskræft har god prognose, men der mangler data om den prognostiske og prædiktive rolle af disse gener hos unge patienter med bestrålet endetarmskræft. Da disse unge ældre patienter viser dårligere resultater med hensyn til progressionsfri overlevelse og højere rater af metastatiske hændelser, antager vi, at kolorektale cancerstamceller (CR-CSC) kan have en rolle i dette dystre resultat. CD133 er en af ​​de bedst karakteriserede markører for CR-CSC'er, har mange undersøgelser vist, at CD133-ekspression var korreleret med overlevelse, tilbagefald, metastaser og kemoterapiresistens i kolorektal cancer.

Så undersøgelsen forsøger at etablere en sammenhæng mellem MS-status og berigelse med CR-CSC, og hvis dette foreslåede forhold kan have betydning for sygdomsudfald og behandlingsresultater.

Patienter og metoder:

Efterforskerne vil indskrive omkring 30 patienter og vil undersøge den koloskopiske biopsi før behandling for

• Type og grad af carcinom under lysmikroskopi efter farvning med hæmatoxylin og eosin.

• Immuncytokemi udført på 4 µ-tykke snit fra paraffinblokke ved brug af streptavidin-biotin-peroxidase-teknikken. Sektionerne vil rutinemæssigt blive afparaffineret, rehydreret gennem graderede alkoholer til destilleret vand. Afparaffinerede sektioner vil blive behandlet med 0,3% hydrogenperoxid i 10 min. Egnet antigenudvinding vil blive udført. Blokerende serum påføres i 10 min. Sektionerne vil blive inkuberet med antistof rejst imod

  1. MMR-proteiner: MLH1, MSH2 eller MSH6,PMS-2.
  2. CD133. Derefter vil efterforskerne indsamle blokkene fra de samme patienter efter at have modtaget neoadjuverende kemoradioterapi og gennemgået en operation og undersøge
  1. Under lysmikroskop efter farvning for: Type og grad af karcinom Angiovaskulær invasion Grad af immunrespons Mønster og invasionsdybde Lymfeknudestatus.
  2. CD 133 positive celletal med samme tidligere rapporterede teknik. Det resulterende immunkompleks vil blive detekteret af et universalfarvningskit ved at følge instruktionerne vedlagt sættet. Objektglassene vaskes flere gange i phosphatbuffer-saltvand og placeres i det i 5 minutter mellem hvert trin, undtagen efter peroxidase-reagens vil vaskningen ske med destilleret vand. Negative og positive kontroller vil blive inkluderet i hver farvningsserie. Immunhistokemisk evaluering vil blive udført ifølge Ren F et al. og Zhang X et al. Digitale billeder vil blive taget med et digitalt kamerasystem