Rola CD133 i statusu mikrosatelitarnego w ocenie raka odbytniczo-esiczego u młodych dorosłych poddanych leczeniu neoadiuwantowemu

Częstość występowania raka jelita grubego na całym świecie wynosi ponad pięćdziesiąt lat. Jednak porównując częstość występowania i cechy kliniczno-patologiczne raka jelita grubego w krajach zachodnich i krajach o ograniczonych zasobach, takich jak Egipt, mediana wieku zachorowań jest znacznie niższa. Raporty z Egiptu wykazały, że CRC wykryto u 11-15% pacjentów poddanych kolonoskopii i zdiagnozowano u 29-31% pacjentów w wieku 40 lat lub młodszych. Podobne dane pochodzą z innych gęsto zaludnionych krajów azjatyckich o ograniczonych zasobach. Ten rak odbytnicy o wczesnym początku jest głównie słabo zróżnicowany, o zaawansowanym rokowaniu, sporadyczny bez predyspozycji rodzinnych. Młodzi pacjenci z rakiem proksymalnej części jelita grubego o wysokim poziomie mikrosatelitarnym (MSI-h ) mają dobre rokowanie, ale brakuje danych na temat prognostycznej i predykcyjnej roli tych genów u młodych pacjentów z napromienianym rakiem odbytnicy. Ponieważ ci młodzi pacjenci wykazują gorsze wyniki pod względem przeżycia wolnego od progresji i wyższego odsetka przypadków przerzutów, stawiamy hipotezę, że komórki macierzyste raka jelita grubego (CR-CSC) mogą odgrywać rolę w tym ponurym wyniku. CD133 jest jednym z najlepiej scharakteryzowanych markerów CR-CSC, wiele badań wykazało, że ekspresja CD133 była skorelowana z przeżyciem, nawrotem, przerzutami i opornością na chemioterapię w raku jelita grubego.

Więc badanie próbuje ustalić korelację między statusem stwardnienia rozsianego a wzbogaceniem w CR-CSC i czy ten proponowany związek może mieć wpływ na wynik choroby i wyniki leczenia.

Pacjenci i metody:

Badacze włączą około 30 pacjentów i zbadają biopsję kolonoskopową wykonaną przed leczeniem

• Typ i stopień zaawansowania raka pod mikroskopem świetlnym po barwieniu hematoksyliną i eozyną.

• Immunocytochemia przeprowadzona na skrawkach o grubości 4 µ z bloczków parafinowych przy użyciu techniki streptawidyna-biotyna-peroksydaza. Skrawki będą rutynowo odparafinowane, ponownie uwodnione za pomocą różnych alkoholi do wody destylowanej. Odparafinowane skrawki będą traktowane 0,3% nadtlenkiem wodoru przez 10 min. Zostanie przeprowadzone odpowiednie odzyskiwanie antygenu. Serum blokujące będzie stosowane przez 10 min. Skrawki będą inkubowane z przeciwciałem skierowanym przeciwko

  1. Białka MMR: MLH1, MSH2 lub MSH6,PMS-2.
  2. CD133. Następnie badacze pobiorą bloczki od tych samych pacjentów po otrzymaniu chemioradioterapii neoadjuwantowej i przeszli operację oraz zbadają
  1. Pod mikroskopem świetlnym po barwieniu na: Typ i stopień zaawansowania raka Inwazję naczyniowo-naczyniową Stopień odpowiedzi immunologicznej Wzór i głębokość inwazji Stan węzłów chłonnych.
  2. Liczbę komórek CD 133-dodatnich tą samą wcześniej opisaną techniką. Powstały kompleks immunologiczny zostanie wykryty za pomocą uniwersalnego zestawu do barwienia zgodnie z instrukcjami dołączonymi do zestawu. Szkiełka przemywa się kilka razy w roztworze soli buforowanej fosforanem i umieszcza w nim na 5 minut pomiędzy każdym etapem, z wyjątkiem odczynnika peroksydazy, który zostanie przemyty wodą destylowaną. Kontrole ujemne i pozytywne zostaną uwzględnione w każdej serii barwienia. Ocena immunohistochemiczna zostanie przeprowadzona zgodnie z Ren F i in. oraz Zhang X i in. Obrazy cyfrowe będą uzyskiwane za pomocą systemu aparatów cyfrowych