De rol van CD133 & microsatellietstatus bij de evaluatie van rectosigmoïdkanker Jongvolwassenen kregen neoadjuvante behandeling

De leeftijdsincidentie van colorectale kanker ligt wereldwijd boven de vijftig jaar. Maar bij vergelijking van de incidentie en klinisch-pathologische kenmerken van colorectale kanker in westerse landen en landen met beperkte middelen zoals Egypte, is er een aanzienlijk lagere mediane leeftijd van incidentie. In Egypte toonden rapporten aan dat CRC werd gedetecteerd bij 11-15% van de patiënten die een colonoscopie ondergingen en dat de diagnose werd gesteld bij 29-31% van de patiënten van 40 jaar of jonger. Vergelijkbare gegevens komen uit andere dichtbevolkte landen met beperkte hulpbronnen in Azië. Deze endeldarmkanker met vroege aanvang is voornamelijk slecht gedifferentieerd, gevorderd bij prognose, sporadisch zonder familiale aanleg. Jonge patiënten met microsatelliet hoge (MSI-h) proximale colonkanker hebben een goede prognose, maar er ontbreken gegevens over de prognostische en voorspellende rol van deze kankers. genen bij jonge patiënten met bestraalde endeldarmkanker. Aangezien die jonge bejaarde patiënten een slechtere uitkomst laten zien in termen van progressievrije overleving en hogere percentages metastatische gebeurtenissen, veronderstellen we dat colorectale kankerstamcellen (CR-CSC) een rol kunnen spelen in deze sombere uitkomst. CD133 is een van de best gekarakteriseerde markers van CR-CSC's, hebben veel onderzoeken aangetoond dat CD133-expressie gecorreleerd was met overleving, recidief, metastase en chemotherapieresistentie bij colorectale kanker.

De studie probeert dus een correlatie vast te stellen tussen de MS-status en verrijking met CR-CSC en of deze voorgestelde relatie implicaties kan hebben voor de uitkomst van de ziekte en de behandelingsresultaten.

Patienten en methodes:

De onderzoekers zullen ongeveer 30 patiënten inschrijven en zullen de colonoscopische biopsie voorafgaand aan de behandeling onderzoeken

• Type en graad van carcinoom onder lichtmicroscopie na kleuring met hematoxyline en eosine.

• Immunocytochemie uitgevoerd op 4 μ-dikke secties van paraffineblokken met behulp van de streptavidine-biotine-peroxidase-techniek. De secties worden routinematig gedeparaffineerd, gerehydrateerd door gegradeerde alcoholen tot gedestilleerd water. Gedeparaffineerde coupes worden gedurende 10 minuten behandeld met 0,3% waterstofperoxide. Geschikt antigeen ophalen zal worden uitgevoerd. Het blokkerende serum wordt gedurende 10 minuten aangebracht. De secties zullen worden geïncubeerd met antilichaam opgewekt tegen

  1. MMR-eiwitten: MLH1, MSH2 of MSH6, PMS-2.
  2. CD133. Vervolgens verzamelen de onderzoekers de blokken van dezelfde patiënten nadat ze neoadjuvante chemoradiotherapie hebben gekregen en een operatie hebben ondergaan en onderzoeken
  1. Onder lichtmicroscoop na kleuring voor: Type en graad van carcinoom Angiovasculaire invasie Mate van immuunrespons Patroon en diepte van invasie Lymfeklierstatus.
  2. CD 133 positieve celtelling met dezelfde eerder gemelde techniek. Het resulterende immuuncomplex wordt gedetecteerd door een universele kleuringskit volgens de instructies die bij de kit zijn gevoegd. De objectglaasjes worden verschillende keren gewassen in fosfaatbufferzoutoplossing en worden er tussen elke stap gedurende 5 minuten in geplaatst, behalve dat na peroxidasereagens wordt gewassen met gedestilleerd water. Negatieve en positieve controles zullen in elke kleuringsreeks worden opgenomen. Immunohistochemische evaluatie zal worden uitgevoerd volgens Ren F et al en Zhang X et al. Digitale beelden worden verkregen met een digitaal camerasysteem