Rolle des CD133- und Mikrosatelliten-Status bei der Bewertung von Rektosigmoid-Krebs Junge Erwachsene erhielten eine neoadjuvante Behandlung

Die Altersinzidenz von Darmkrebs liegt weltweit bei über 50 Jahren. Wenn man jedoch die Inzidenz und die klinisch-pathologischen Merkmale von Darmkrebs in westlichen Ländern und Ländern mit begrenzten Ressourcen wie Ägypten vergleicht, gibt es ein signifikant niedrigeres Durchschnittsalter der Inzidenz. Berichte aus Ägypten zeigten, dass CRC bei 11-15 % der Patienten festgestellt wurde, die sich einer Koloskopie unterzogen, und bei 29-31 % der Patienten im Alter von 40 Jahren oder jünger diagnostiziert wurde. Ähnliche Daten stammen aus anderen bevölkerungsreichen Ländern Asiens mit begrenzten Ressourcen. Dieser früh einsetzende Rektumkrebs ist hauptsächlich schlecht differenziert, in der Prognose fortgeschritten, sporadisch ohne familiäre Prädisposition. Junge Patienten mit Mikrosatelliten-hohem (MSI-h) proximalem Dickdarmkrebs haben eine gute Prognose, aber es fehlen Daten über die prognostische und prädiktive Rolle dieser Gene bei jungen Patienten mit bestrahltem Rektumkarzinom. Da diese jungen Patienten ein schlechteres Ergebnis in Bezug auf das progressionsfreie Überleben und eine höhere Rate an metastasierenden Ereignissen aufweisen, nehmen wir an, dass kolorektale Krebsstammzellen (CR-CSC) bei diesem düsteren Ergebnis eine Rolle spielen könnten. CD133 ist eines der am besten charakterisierten Marker von CR-CSCs, viele Studien haben gezeigt, dass die CD133-Expression mit Überleben, Rezidiv, Metastasierung und Chemotherapieresistenz bei Darmkrebs korreliert war.

Die Studie versucht also, eine Korrelation zwischen dem MS-Status und der Anreicherung mit CR-CSC herzustellen und ob diese vorgeschlagene Beziehung Auswirkungen auf den Krankheitsverlauf und die Behandlungsergebnisse haben könnte.

Patienten und Methoden:

Die Ermittler werden etwa 30 Patienten einschreiben und die koloskopische Biopsie vor der Behandlung untersuchen

• Art und Grad des Karzinoms unter dem Lichtmikroskop nach Färbung mit Hämatoxylin und Eosin.

• Immunzytochemie durchgeführt an 4 µ dicken Schnitten von Paraffinblöcken unter Verwendung der Streptavidin-Biotin-Peroxidase-Technik. Die Schnitte werden routinemäßig entparaffiniert und durch abgestufte Alkohole zu destilliertem Wasser rehydriert. Entparaffinierte Schnitte werden 10 min lang mit 0,3 % Wasserstoffperoxid behandelt. Ein geeigneter Antigen-Retrieval wird durchgeführt. Das Blocking-Serum wird 10 Minuten lang aufgetragen. Die Schnitte werden mit Antikörpern inkubiert, gegen die gezüchtet wurde

  1. MMR-Proteine: MLH1, MSH2 oder MSH6, PMS-2.
  2. CD133. Dann werden die Prüfärzte die Blöcke von denselben Patienten sammeln, nachdem sie eine neoadjuvante Radiochemotherapie erhalten und sich einer Operation unterzogen haben, und untersuchen sie
  1. Unter dem Lichtmikroskop nach Färbung auf: Art und Grad des Karzinoms Angiovaskuläre Invasion Grad der Immunantwort Muster und Tiefe der Invasion Zustand der Lymphknoten.
  2. Zählung positiver CD 133 - Zellen mit der gleichen zuvor beschriebenen Technik . Der resultierende Immunkomplex wird mit einem universellen Färbekit gemäß den dem Kit beigefügten Anweisungen nachgewiesen. Die Objektträger werden mehrmals in phosphatgepufferter Kochsalzlösung gewaschen und zwischen jedem Schritt für 5 Minuten darin platziert, außer nach dem Peroxidase-Reagenz wird das Waschen mit destilliertem Wasser durchgeführt. Negativ- und Positivkontrollen werden in jede Färbeserie aufgenommen. Die immunhistochemische Bewertung erfolgt gemäß Ren F et al. und Zhang X et al. Digitale Bilder werden mit einem digitalen Kamerasystem erhalten