Rollen för CD133 och mikrosatellitstatus vid utvärdering av rektosigmoid cancer Unga vuxna fick neoadjuvant behandling

Åldersincidensen för kolorektal cancer är över femtio år gammal i hela världen. Men när man jämför förekomsten och de kliniskt patologiska särdragen av kolorektal cancer i västländer och länder med begränsade resurser som Egypten, finns det signifikant lägre medianålder för incidens. I Egypten visade rapporter att CRC upptäcktes hos 11-15% av patienterna som genomgick koloskopi och diagnostiserades hos 29-31% av patienterna i åldern 40 år eller yngre. Liknande data kommer från andra mycket befolkade länder med begränsade resurser i Asien . Denna tidiga ändtarmscancer är huvudsakligen dåligt differentierad, framskriden vid prognos, sporadisk utan familjär anlag. Unga patienter med mikrosatellit hög (MSI-h ) proximal cancer i tjocktarmen har god prognos men det saknas data om den prognostiska och prediktiva rollen av dessa. gener hos unga patienter med bestrålad rektalcancer. Eftersom dessa unga åldrade patienter visar sämre resultat när det gäller progressionsfri överlevnad och högre frekvens av metastaserande händelser, antar vi att kolorektala cancerstamceller (CR-CSC) kan ha en roll i detta dystra resultat. CD133 är en av de bäst karakteriserade markörer för CR-CSCs, har många studier visat att CD133-uttryck var korrelerat med överlevnad, återfall, metastaser och kemoterapiresistens vid kolorektal cancer.

Så studien försöker fastställa en korrelation mellan MS-status och anrikning med CR-CSC och om detta föreslagna samband kan ha konsekvenser för sjukdomsresultat och behandlingsresultat.

Patienter och metoder:

Utredarna kommer att rekrytera cirka 30 patienter och kommer att undersöka den koloskopiska biopsien före behandlingen för

• Typ och grad av karcinom under ljusmikroskopi efter färgning med hematoxylin och eosin.

• Immuncytokemi utfördes på 4 µ tjocka snitt från paraffinblock med användning av streptavidin-biotin-peroxidas-tekniken. Sektionerna kommer rutinmässigt att avparaffineras, rehydreras genom graderade alkoholer till destillerat vatten. Avparaffinerade sektioner kommer att behandlas med 0,3 % väteperoxid i 10 minuter. Lämplig antigenåtervinning kommer att utföras. Blockerande serum kommer att appliceras i 10 min. Sektionerna kommer att inkuberas med antikroppar mot

  1. MMR-proteiner: MLH1, MSH2 eller MSH6,PMS-2.
  2. CD133. Sedan kommer utredarna att samla in blocken från samma patienter efter att ha fått neoadjuvant kemoradioterapi och genomgått operation och undersökt
  1. Under ljusmikroskop efter färgning för: Typ och grad av karcinom Angiovaskulär invasion Grad av immunsvar Mönster och invasionsdjup Lymfkörtelstatus.
  2. CD 133 positivt cellantal med samma tidigare rapporterade teknik. Det resulterande immunkomplexet kommer att detekteras av ett universellt färgningskit enligt instruktionerna som bifogas satsen. Objektglasen kommer att tvättas flera gånger i fosfatbuffertsaltlösning och placeras i den i 5 minuter mellan varje steg, förutom efter peroxidasreagens kommer tvätten att ske med destillerat vatten. Negativa och positiva kontroller kommer att inkluderas i varje färgningsserie. Immunhistokemisk utvärdering kommer att göras enligt Ren F et al och Zhang X et al. Digitala bilder kommer att erhållas med ett digitalkamerasystem