Роль CD133 и микросателлитного статуса в оценке рака ректосигмовидной кишки у молодых взрослых, получавших неоадъювантное лечение

Возрастная заболеваемость колоректальным раком во всем мире превышает пятьдесят лет. Но при сравнении заболеваемости и клинико-патологических особенностей колоректального рака в западных странах и странах с ограниченными ресурсами, таких как Египет, средний возраст заболеваемости значительно ниже. В Египте отчеты показали, что CRC был обнаружен у 11-15% пациентов, которым была проведена колоноскопия, и диагностирован у 29-31% пациентов в возрасте 40 лет и моложе. Аналогичные данные поступают из других густонаселенных стран Азии с ограниченными ресурсами. Этот рак прямой кишки с ранним началом в основном плохо дифференцирован, прогрессирует в прогнозе, спорадический, без семейной предрасположенности. Молодые пациенты с микросателлитным высоким (MSI-h) раком проксимального отдела толстой кишки имеют хороший прогноз, но отсутствуют данные о прогностической и прогностической роли этих заболеваний. генов у молодых пациентов с облученным раком прямой кишки. Поскольку эти пациенты молодого возраста демонстрируют худший исход с точки зрения выживаемости без прогрессирования и более высокой частоты метастатических событий, мы предполагаем, что стволовые клетки колоректального рака (CR-CSC) могут играть роль в этом печальном исходе. CD133 является одним из наиболее хорошо охарактеризованных клеток. маркеров CR-CSC, многие исследования показали, что экспрессия CD133 коррелирует с выживаемостью, рецидивами, метастазированием и резистентностью к химиотерапии при колоректальном раке.

Таким образом, исследование пытается установить корреляцию между статусом РС и обогащением CR-CSC, а также может ли эта предполагаемая связь иметь значение для исхода заболевания и результатов лечения.

Пациенты и методы:

Исследователи зарегистрируют около 30 пациентов и изучат колоноскопическую биопсию до лечения на наличие

• Тип и степень карциномы при световой микроскопии после окрашивания гематоксилином и эозином.

• Иммуноцитохимия, выполненная на срезах толщиной 4 мкм из парафиновых блоков с использованием стрептавидин-биотин-пероксидазной методики. Срезы обычно депарафинизируют, регидратируют через градуированные спирты до дистиллированной воды. Депарафинированные срезы обрабатывают 0,3% перекисью водорода в течение 10 мин. Будет проведен соответствующий поиск антигена. Блокирующая сыворотка наносится на 10 мин. Срезы будут инкубировать с антителами, выработанными против

  1. Белки MMR: MLH1, MSH2 или MSH6, PMS-2.
  2. CD133. Затем исследователи соберут блоки у тех же пациентов, получивших неоадъювантную химиолучевую терапию и перенесших операцию, и изучат
  1. Под световым микроскопом после окрашивания: Тип и степень карциномы Ангиоваскулярная инвазия Степень иммунного ответа Тип и глубина инвазии Состояние лимфатических узлов.
  2. Положительный подсчет клеток CD 133 с помощью той же методики, о которой сообщалось ранее. Образовавшийся иммунный комплекс будет обнаружен универсальным набором для окрашивания в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к набору. Предметные стекла промывают несколько раз в солевом растворе фосфатного буфера и помещают в него на 5 минут между каждым этапом, за исключением того, что после реагента пероксидазы промывка будет дистиллированной водой. Отрицательные и положительные контроли будут включены в каждую серию окрашивания. Иммуногистохимическая оценка будет проводиться в соответствии с Ren F et al и Zhang X et al. Цифровые изображения будут получены с помощью системы цифровых камер