Ruolo del CD133 e dello stato dei microsatelliti nella valutazione del cancro del rettosigmoide I giovani adulti hanno ricevuto un trattamento neoadiuvante

L'età di incidenza del cancro del colon-retto è superiore a cinquant'anni in tutto il mondo. Tuttavia, confrontando l'incidenza e le caratteristiche clinicopatologiche del cancro del colon-retto nei paesi occidentali e nei paesi con risorse limitate come l'Egitto, vi è un'età media di incidenza significativamente inferiore. In Egitto i rapporti hanno mostrato che il CRC è stato rilevato nell'11-15% dei pazienti sottoposti a colonscopia e diagnosticato nel 29-31% dei pazienti di età pari o inferiore a 40 anni. Dati simili provengono da altri paesi asiatici con risorse limitate altamente popolati. Questo carcinoma del retto ad esordio precoce è principalmente scarsamente differenziato, avanzato alla prognosi, sporadico senza predisposizione familiare. I giovani pazienti con carcinoma del colon prossimale ad alto microsatellite (MSI-h) hanno una buona prognosi ma mancano dati sul ruolo prognostico e predittivo di questi geni in giovani pazienti con cancro del retto irradiato. Poiché quei pazienti di giovane età mostrano un esito peggiore in termini di sopravvivenza libera da progressione e tassi più elevati di eventi metastatici, ipotizziamo che le cellule staminali del cancro del colon-retto (CR-CSC) possano avere un ruolo in questo triste esito. CD133 è uno dei meglio caratterizzati marcatori di CR-CSC, molti studi hanno dimostrato che l'espressione di CD133 era correlata con sopravvivenza, recidiva, metastasi e resistenza alla chemioterapia nel cancro del colon-retto.

Quindi lo studio sta cercando di stabilire una correlazione tra lo stato della SM e l'arricchimento con CR-CSC e se questa relazione proposta possa avere implicazioni sull'esito della malattia e sui risultati del trattamento.

Pazienti e metodi:

Gli investigatori arruoleranno circa 30 pazienti ed esamineranno la biopsia colonscopica pre-trattamento per

• Tipo e grado di carcinoma al microscopio ottico dopo colorazione con ematossilina ed eosina.

• Immunocitochimica eseguita su sezioni spesse 4 µ da blocchi di paraffina utilizzando la tecnica streptavidina-biotina-perossidasi. Le sezioni saranno regolarmente deparaffinate, reidratate attraverso alcoli graduati ad acqua distillata. Le sezioni deparaffinate saranno trattate con acqua ossigenata allo 0.3% per 10 min. Verrà effettuato un adeguato recupero dell'antigene. Il siero bloccante verrà applicato per 10 min. Le sezioni saranno incubate con anticorpo sollevato contro

  1. Proteine ​​MMR: MLH1, MSH2 o MSH6, PMS-2.
  2. CD133. Quindi gli investigatori raccoglieranno i blocchi dagli stessi pazienti dopo aver ricevuto chemioradioterapia neoadiuvante e sottoposti a intervento chirurgico ed esamineranno
  1. Al microscopio ottico dopo la colorazione per: Tipo e grado di carcinoma Invasione angiovascolare Grado di risposta immunitaria Modello e profondità dell'invasione Stato dei linfonodi.
  2. Conta delle cellule CD 133 positive con la stessa tecnica precedentemente riportata. Il complesso immunitario risultante verrà rilevato da un kit di colorazione universale seguendo le istruzioni allegate al kit. I vetrini saranno lavati più volte in tampone fosfato salino e saranno posti in essa per 5 minuti tra ogni passaggio tranne che dopo il reagente perossidasi il lavaggio avverrà con acqua distillata. I controlli negativi e positivi saranno inclusi in ogni serie di colorazione. La valutazione immunoistochimica sarà effettuata secondo Ren F et al e Zhang X et al . Le immagini digitali saranno ottenute con un sistema di fotocamera digitale