单药乐伐替尼的 II 期研究

研究背景和原理：

A. 乳腺癌中的 RET 和内分泌抵抗 RET 是一种雌激素反应基因，临床前研究表明 RET 和 ER 之间存在相互作用。 已经描述了 RET 和 ERα 通路之间的显着相互作用，在存在功能性 RET 的情况下观察到对雌激素刺激的反应增加。 RET 与对他莫昔芬和芳香酶抑制剂的耐药性相关，并且已在激素耐药细胞系和原发性肿瘤中证实 RET 表达增加。联合抗雌激素和抗 RET 治疗管腔乳腺癌对细胞生长的影响大于任何一种治疗独自的。 这两类药物具有不同的作用机制； a RET TKI 通过诱导细胞凋亡减少生长，而抗 ERα 减少细胞增殖，形成双重治疗的生物学基础。他莫昔芬和 vandetinib（一种 RET 抑制剂）的双重治疗导致小鼠 MCF7 异种移植物中肿瘤生长速率的更大降低据报道，.RET 在高达 75% 的 ER+ 乳腺癌 (n=20) 中过度表达，而在一项小型研究中，只有 10% 的 ER 阴性乳腺癌 (n=10) 过度表达。 最近，研究人员检测了来自新加坡国立大学医院的 94 份存档乳腺癌标本，发现 RET 过度表达 (2-3+) 存在于 59% 的 ER 阴性乳腺癌 (n=39) 和 62% 的 ER阳性乳腺癌 (n=55)

将 RET 抑制剂与乳腺癌内分泌治疗相结合的临床经验有限，只有一项报告的研究使用了凡德他尼。 在这项研究中，127 名患有激素受体阳性、骨为主性疾病的绝经后转移性乳腺癌患者被随机分配接受氟维司群单药治疗和氟维司群联合凡德他尼治疗。 两个治疗组之间的临床获益率、无进展生存期或总生存期没有差异。 然而，凡德他尼是一种比乐伐替尼更弱的 RET 抑制剂。 Lenvatinib 已于 2013 年被美国食品和药物管理局授予治疗甲状腺癌的孤儿药称号，但并未积极开发用于治疗乳腺癌。

研究人员使用 Western blot 检测了 9 个 ER+ 乳腺癌细胞系的 RET 表达，鉴定出 4 个高表达（BT474、MB361、HCC1419、UACC812）、2 个正常表达（MCF7、CAMA1）和 3 个低表达（T47D、 ZR-75-1、BT483）。 为了评估乐伐替尼联合内分泌治疗对具有不同 RET 表达的 ER+ 乳腺癌细胞系的影响，研究人员使用 6 种细胞系进行了实验，其中 2 种具有高 RET 表达（BT474、MB361），2 种具有正常 RET 表达（MCF7、 CAMA1）和 2 个具有低 RET 表达（T47D、ZR-75-1）。 为每个细胞系建立了单独对他莫昔芬和乐伐替尼的 IC50，然后对每种药物进行 3 种不同剂量的联合治疗。 分别使用半胱天冬酶 3/7 和 MTT 测定法测量细胞凋亡和增殖。 初步实验表明乐伐替尼在 ER 阳性乳腺癌细胞系中具有活性，无论 RET 表达水平如何。 在所有测试的 6 种 ER 阳性乳腺癌细胞系中，乐伐替尼至少与他莫昔芬相加，与 BT474、CAMA1 和 T47D 细胞系中的单一药物他莫昔芬相比，该组合导致≥50% 的细胞杀伤。 这些临床前观察表明乐伐替尼联合内分泌治疗在 ER 阳性乳腺癌治疗中的潜在作用。

将细胞接种在 96 孔板上，24 小时后，用不同剂量的他莫昔芬和乐伐替尼同时处理细胞（他莫昔芬为 0、1 或 5 µM，乐伐替尼为 0、5、10 µM）并孵育 72 小时。 使用 CCK-8 测定法评估细胞活力。

B.单药乐伐替尼治疗激素受体阳性乳腺癌临床疗效初步观察

研究人员先前假设，将 RET 抑制剂（如乐伐替尼）与内分泌治疗相结合可能会增强激素受体阳性乳腺癌的抗肿瘤作用。 研究人员最近启动了一项关于乐伐替尼 + 来曲唑作为激素受体阳性乳腺癌患者新辅助治疗的研究。 符合条件的患者接受两周的单药乐伐替尼治疗，然后接受 12 周的乐伐替尼 + 来曲唑治疗。 两名患者已入组，研究人员在单药乐伐替尼治疗 2 周后通过超声观察到肿瘤缩小了 10-15%。 为了证实这些有趣的观察结果，研究人员打算使用机会窗设计，使用大约 2 周的单药乐伐替尼治疗更多正在等待确定性乳腺癌手术的新诊断的早期乳腺癌患者，并评估肿瘤治疗前和治疗后肿瘤活检对超声和组织学变化的反应。 这种设计将使研究人员能够扩大目标人群以进行快速入组，以快速了解乐伐替尼在人乳腺癌体内的生物活性。