用自体微碎片脂肪组织治疗骨关节炎。

2 研究目的 研究关节内注射使用 Lipogems 系统制备的自体微碎片脂肪组织是否会影响膝骨关节炎患者报告的结果。

假设 使用自体微碎片脂肪组织进行治疗有可能逆转膝关节骨关节炎的退行性变化。 与安慰剂治疗相比，患者将体验到更好的患者报告健康状况。

零假设 将自体微碎片脂肪组织治疗与安慰剂治疗相比，患者报告的结果没有差异。

3 背景 膝关节骨关节炎 (OA) 是一种破坏性关节疾病，会导致软骨退化、下层骨骼损伤和关节形态改变1。 由于人口老龄化 2,3 的预期寿命延长，这是一个主要的公共卫生问题。 目前尚无经批准的可逆转形态学变化的药物治疗。 常规治疗包括物理治疗、止痛药、牙套和终末期 OA 手术膝关节置换术4。

在过去十年中，研究人员开始探索 OA5 中间充质干细胞 (MSC) 的再生潜力。 MSC 是多能祖细胞，能够产生骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成肌细胞和肌腱细胞6。 MSCs 于 19987 年首次用于治疗软骨缺陷，并于 20028 年用于治疗 OA。 从那时起，许多病例报告和前瞻性系列已经发表，显示出对疼痛和软骨厚度的显着短期和长期影响5。 最新一项包含 1128 名患者、涉及 1856 个关节的前瞻性病例系列显示，使用改良的膝/髋骨关节炎结果评分 (KOOS/HOOS)，86% 的患者在 3 个月时和 91% 的患者在 12 个月时改善至少 50%问卷 9. 只有 0.9% 的患者在治疗后没有表现出改善。 然而，在解释这些研究时，应该记住它们都是四级证据，因此容易出现偏差。

在 OA9,10 的 MSC 治疗中，未观察到感染或肿瘤形成等严重不良反应。 非操纵或最低限度操纵的细胞疗法已用于广泛的医疗条件，包括：中风、心肌梗塞、克罗恩氏病、类风湿性关节炎和隆胸。 已发表超过 17,000 篇科学文章，报道了 320,000 多名患者的治疗情况11。 没有提出严重的安全问题 12。

间充质干细胞可来源于骨髓或脂肪组织5。 大多数研究都是针对骨髓来源的干细胞进行的。 研究显示出令人鼓舞的结果，但 2016 年的一项随机研究发现，与使用盐水的安慰剂相比，使用骨髓抽吸浓缩物进行积极治疗在治疗关节炎膝关节方面没有效果 13。 过去几年发表的一系列研究表明，脂肪来源的间充质干细胞 (AMSC) 具有良好的效果。 通过使用 AMSC，可以从少量组织中收获大量细胞，从而避免在培养物中扩增细胞的昂贵且耗时的过程 5,9。

间充质干细胞被认为能够通过充当“定点药库”14 来激活和影响微环境。 在过去的几年中，使用脂肪来源的间充质干细胞治疗 OA 引起了极大的兴趣 15、16，而应用于酶处理和/或扩增细胞的复杂监管问题导致了微操作组织的发展 17。 Lipogems 系统就是这样一种系统，其中脂肪组织被微碎片化并洗掉血液残留物。 由此产生的产品是安全的（2016 年获得 FDA 批准），据说可有效治疗不同的病理 18，但缺乏一级证据。

在本项目背后的研究小组对 20 名膝关节 OA 患者进行的初步研究中，Lipogems 系统显示出令人鼓舞的结果（已提交）。 没有出现安全问题，在 3 个月和 12 个月的随访中，患者在 KOOS 的五个子量表中从 13 分提高到 21 分。 Lipogems 系统于 2018 年在丹麦市场推出。 迫切需要进行最先进的随机对照试验，比较 Lipogems 系统与安慰剂治疗膝骨关节炎的效果。

4 研究设计 4.1 患者参与研究设计 为了确保研究的最高相关性，对 10 名被认为符合纳入条件的膝骨关节炎患者进行了定性访谈。 他们被问到以下两个问题：1) 膝关节最大的问题是什么？ 2) 膝盖手术后最重要的成功标准是什么？ 根据答案开发和选择端点。

4.5 时间表计划于 2018 年 11 月 15 日开始纳入患者。 预计学习年限为4年；如果每月平均纳入 8 名患者，则招募本身预计将持续 1.5 年。

4.6 试验的终止 如果严重不良事件被认为与治疗有因果关系，项目经理有责任与其他研究者就是否应终止试验展开讨论。

4.7 随访 3、6、12、24个月后进行随访。 研究护士 1 在门诊进行随访。 如果患者没有参加后续调查，他们将通过电话联系最多 3 次，并被要求通过邮件寄回已填写的问卷。

4.8 数据登记 所有相关数据都记录在 RedCap 专门为试验设计的数据库中。 数据注册将报告给丹麦数据保护局。

注册了以下数据：

4.8.1 纳入考试日期。 社会安全号码 人口统计参数：年龄、性别。 风险参数：ASA 评分、吸烟、糖尿病、冠心病、风湿病（RA 或结缔组织病）。

工作类型 体育活动 KOOS Tegner 活动量表 Kellgren-Lawrence 评分

4.8.2 在 3、6 和 12 个月时跟进 检查日期。 工作状态变化 体育活动 KOOS Tegner 活动量表 供体部位发病率

4.9 生物材料

创建一个研究生物库用于储存组织。 以下组织将被储存：

移植物样本。

5 人群 因膝关节骨性关节炎而遭受疼痛和功能障碍并转诊至参与部门之一的患者有资格纳入。 符合纳入标准但不愿参加的患者按照科室的标准方案进行治疗。

5.1 纳入程序 转诊至相关医院骨科的患者在门诊就诊。 如果他们符合纳入标准，他们将被口头告知该研究，提供书面患者信息，并提供与研究护士 1 和调查外科医生的预约。

在这次预约中，将重新评估患者是否符合纳入标准。 如果是这样，患者将再次被口头告知该研究，并有机会 - 在知情的基础上没有任何压力 - 决定他/她是否想参加试验。 患者被告知他/她有权进行 24 小时反思。

所有评估合格的患者均根据配偶要求进行登记。

7 安全性 7.1 风险和副作用 项目团队进行了一项试点研究，未发现重大安全问题（最终手稿已提交出版）。 非操纵或最低限度操纵的细胞疗法已用于广泛的医疗条件，包括：中风、心肌梗塞、克罗恩氏病、类风湿性关节炎和隆胸。 已发表超过 17,000 篇科学文章，报道了 320,000 多名患者的治疗情况11。 没有提出严重的安全问题 12。 但是，始终存在未知副作用的风险。

7.2 教育培训 受过培训的人员在调查现场进行处理、观察和测量。

7.3 不良事件 在本文中，不良事件定义为发生的任何意外的、不利的发现、症状或疾病，无论是否被认为与研究相关。 将记录不良事件。

8 统计 8.1 样本量 将包括 120 名患者；每组60例。 样本量计算基于 KOOS 中 10 点的临床相关差异、15 的标准偏差 (SD) 和 0.90 的功效（双侧）。 需要98名患者；由于退出的风险，将包括 120 名患者；每组60个。 KOOS.NU 推荐使用的 SD 和临床相关差异

. 8.2 终点分析 描述性地描述了两组的人口统计参数以及主要和次要终点。 根据变量的特征和分布，利用相关统计数据对两组的主要和次要结局进行比较。 每组都描述了一段时间内结果的变化。

所有统计测试都将在双侧 5% 的显着性水平下进行，并在适当的情况下提供 95% 的置信区间。 没有计划进行正式的中期分析，因此在一年分析之前不会进行统计测试。 一年的分析将在所有参与者完成一年的随访并且有足够的时间进行数据输入和验证后进行。

在进行任何分析之前，将调查缺失数据模式，并在可能的情况下获取和总结缺失数据的原因。 主要分析将作为意向性治疗分析进行，其中包括所有缺少结果数据的参与者，除非有明确证据表明其基本假设不合适。 将执行敏感性分析，通过在随机缺失和非随机缺失假设下使用多重插补来估算缺失数据，以评估结果的稳健性。 还将执行每个协议分析。

11 伦理学 11.1 伦理学考虑 本研究是根据赫尔辛基宣言的原则进行的。

11.2 同意声明 所有患者都将收到有关该研究的口头和书面信息。 纳入将在获得同意声明后进行。 研究人员有责任向患者提供有关研究过程、目的、潜在风险和益处的全面口头和书面信息。

12 数据处理 所有数据将存储在RedCap中。 患者将通过分配的编号进行识别。 在研究完成时，所有可识别的数据都将被销毁。 该项目将报告给丹麦数据保护局。 该项目将遵循丹麦关于个人数据存储和处理的法案。