Genetická studie jaterních enzymů u pacientů s vedlejšími účinky antidepresiv

Design studie Jedná se o naturalistickou studii šedesáti pacientů, která bude zahrnovat 30 pacientů, kteří měli vedlejší významné nežádoucí reakce z léčby antidepresivy metabolizovanými CYP2D6 a 2C19 (skupina LÉČBA-INTOLERANČNÍ) a 30 pacientů, kteří reagovali na léčbu stejnou skupinou antidepresiv bez významné nežádoucí účinky (skupina CONTROL). Předpokládá se, že studie bude trvat jeden rok.

Jakmile bude dosaženo náboru, souhlasu subjektu a kompetence k účasti, bude diagnóza posouzena prostřednictvím klinického pohovoru s pomocí lékařských záznamů, pokud jsou k dispozici. K určení expozice antidepresivům metabolizovaným CYP450 2D6 a 2C19 a nepřítomnosti souběžných inhibitorů CYP 2D6 a 2C19 bude odebrána kompletní anamnéza léků, včetně všech známých léků, jejich dávek a délky užívání. Seznam antidepresiv metabolizovaných CYP450 2D6 a 2C19 a jejich inhibitorů je připojen. Pokud se expozice potvrdí, bude každý subjekt dotazován pomocí anglické verze UKU (Udvalg for Kliniske Undersogelser) Rating Scale14, aby se zpětně vyhodnotily jejich vedlejší účinky léků metabolizovaných enzymy CYP 2D6 a 2C19. Použijeme moduly 1, 3 a 4 UKU pro "psychické", "autonomní" a respektive "jiné" vedlejší účinky. Do skupiny LÉČBA-INTOLERANTNÍ budou zařazeni pouze pacienti, kteří měli výrazné vedlejší účinky jednoho léku nebo buď středně závažné nebo výrazné vedlejší účinky dvou léků metabolizovaných enzymy CYP 2D6 a 2C19, podle UKU. Subjekty, které nemají žádné nebo mírné nežádoucí účinky, budou zařazeny do skupiny CONTROL. Očekává se, že rozhovor bude trvat přibližně devadesát minut a bude veden vedlejším vyšetřovatelem (Adriana Foster, MD).

Účastníci studie budou požádáni, aby si vypláchli ústa vodou, aby odstranili částice jídla, a plivali sliny do sběrného pohárku, dokud hladina tekutiny nedosáhne rysky vyznačené na nádobce (~2 ml). Použijeme sadu Oragene™ pro samosběr DNA (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Kanada).

Sliny budou dopravovány do laboratoří GEM, které se nacházejí v kampusu MCG, výzkumným personálem. Genomická DNA bude extrahována pomocí činidla a metody dodané výrobcem, Oragene. To bude použito jako templát pro amplifikaci relevantních oblastí CYP450 2D6 a 2C19. Produkty PCR budou náhodně štěpeny na 50 až 100 bp štěpením DNázou I. Tyto fragmenty budou dále značeny fykoerythrinem (PE), fluorescenčním barvivem. Fragmenty označené PE budou hybridizovány s P450 Roche AmpliChip, promyty a skenovány Affymetrix automatizovanou GeneChip fluidickou stanicí 450Dx a Affymetrix GeneChip skenerem 3000Dx s GeneChip Operating Software Dx 1.1.3. Data budou analyzována pomocí AmpliChip CYP450_US Data Analysis za účelem stanovení genotypu pro 2D6 (celkově hodnotí 27 mutačních míst, deleci a duplikaci) a 2C19 (2 mutační místa). Výsledky genotypizace budou analyzovány stejným softwarem pro predikci fenotypu (ultra rychlý, extenzivní, střední a slabý metabolizátor).

Celkově studie vyžaduje od účastníka pouze jednu návštěvu; po dokončení rozhovoru a vzorku slin bude role účastníka ve výzkumu splněna. Tato studie bude provedena v celém rozsahu v zařízeních Medical College of Georgia. Doufáme, že prokážeme, že míra alel 2D6 a 2C19, které jsou spojeny se špatným metabolizmem v populaci netolerující léčbu, daleko překročí míru zjištěnou u populace pacientů, kteří užívají antidepresiva bez nežádoucích účinků.