Májenzimek genetikai vizsgálata olyan betegeknél, akiknél antidepresszánsok mellékhatásai vannak

A vizsgálat felépítése Ez egy hatvan beteget érintő naturalista vizsgálat, amelyben 30 olyan beteg vesz részt, akiknél jelentős mellékhatások jelentkeztek a CYP2D6 és 2C19 által metabolizált antidepresszánsokkal való kezelés következtében (KEZELÉS-INTOLERÁNS csoport), és 30 olyan beteg, akik reagáltak az azonos csoportú antidepresszánsokkal végzett kezelésre jelentős káros hatások (CONTROL csoport). A tanulmány várhatóan egy évig tart.

Amint a toborzás, az alany beleegyezése és a részvételhez való alkalmasság megtörtént, a diagnózist klinikai interjún keresztül értékelik, amelyet orvosi feljegyzések segítségével, ha rendelkezésre állnak. A CYP450 2D6 és 2C19 által metabolizált antidepresszánsok expozíciójának, valamint az egyidejű CYP 2D6 és 2C19 inhibitorok hiányának megállapítása érdekében teljes gyógyszerelőzményt kell felvenni, beleértve az összes ismert gyógyszert, azok dózisait és a használat időtartamát. A CYP450 2D6 és 2C19 által metabolizált antidepresszánsok és inhibitoraik listája mellékelve van. Ha az expozíció megerősítést nyer, minden alany interjút készít az UKU (Udvalg for Kliniske Undersogelser) besorolási skála14 angol nyelvű változatával, hogy retrospektív módon értékeljék a CYP 2D6 és 2C19 enzimek által metabolizált gyógyszerek mellékhatásait. Az UKU 1., 3. és 4. modulját fogjuk használni „pszichés”, „autonóm” és „egyéb” mellékhatásokhoz. Csak azok a betegek szerepelnek a KEZELÉS-INTOLERÁNS csoportban, akiknél jelentős mellékhatások jelentkeztek egy gyógyszer hatására, vagy mérsékelt vagy jelentős mellékhatások jelentkeztek két, a CYP 2D6 és 2C19 enzimek által metabolizált gyógyszerrel az UKU szerint. Azok az alanyok, akiknek semmilyen vagy enyhe mellékhatásuk nincs, bekerülnek a CONTROL csoportba. A témainterjú várhatóan körülbelül kilencven percig tart, és egy alvizsgáló (Adriana Foster, MD) fogja lefolytatni.

A vizsgálat résztvevőit arra kérik, hogy öblítsék ki vízzel a szájukat, hogy eltávolítsák az élelmiszer-részecskéket, és köpjék ki a nyálat egy gyűjtőpohárba, amíg a folyadék szintje el nem éri a tartályon jelzett vonalat (~2 ml). Oragene ™ DNS öngyűjtő készletet fogunk használni (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Kanada).

A nyálat az MCG campuson található GEM Labs-ba szállítják a kutatók. A genomi DNS-t a gyártó, az Oragene által biztosított reagenssel és módszerrel extraháljuk. Ezt használják sablonként a CYP450 2D6 és 2C19 releváns régióinak amplifikálására. A PCR-termékeket véletlenszerűen hasítják 50-100 bp-re DNáz I-gyel történő emésztéssel. Ezeket a fragmentumokat fikoeritrinnel (PE), egy fluoreszcens festékkel tovább jelöljük. A PE-vel jelölt fragmenseket a P450 Roche AmpliChiphez hibridizálják, mossák és szkennelik az Affymetrix automatizált GeneChip fluidics Station 450Dx és az Affymetrix GeneChip szkenner 3000Dx a GeneChip Operating Software Dx 1.1.3-mal. Az adatokat az AmpliChip CYP450_US Data Analysis elemzi, hogy meghatározza a 2D6 (teljesen 27 mutációs helyet, deléciót és duplikációt) és 2C19 (2 mutációs hely) genotípusát. A genotipizálási eredményeket ugyanaz a szoftver elemzi a fenotípus (ultragyors, kiterjedt, közepes és gyenge metabolizáló) előrejelzésére.

Összességében a vizsgálat csak egy látogatást igényel a résztvevőtől; az interjú és a nyálminta elvégzése után a résztvevő szerepe a kutatásban beteljesül. Ezt a tanulmányt teljes egészében a Georgiai Orvostudományi Főiskola létesítményeiben fogják elvégezni. Reméljük, hogy bizonyítani tudjuk, hogy a rossz metabolizáló státuszhoz kapcsolódó 2D6 és 2C19 allélok aránya a kezelést nem toleráns populációban messze meghaladja az antidepresszánsokat káros hatások nélkül szedő betegpopulációban tapasztalt arányt.