Estudio genético de enzimas hepáticas en pacientes con efectos secundarios por antidepresivos

Diseño del estudio Este es un estudio naturalista de sesenta pacientes, que incluirá a 30 pacientes que tuvieron reacciones adversas secundarias significativas del tratamiento con antidepresivos metabolizados por CYP2D6 y 2C19 (grupo TRATAMIENTO-INTOLERANTE) y 30 pacientes que respondieron al tratamiento con el mismo grupo de antidepresivos sin efectos adversos significativos (grupo CONTROL). Se espera que el estudio dure un año.

Una vez que se haya logrado el reclutamiento, el consentimiento del sujeto y la competencia para participar, el diagnóstico se evaluará a través de una entrevista clínica, con la ayuda de registros médicos, cuando estén disponibles. Se tomará un historial completo de medicamentos, incluidos todos los medicamentos conocidos, sus dosis y la duración del uso, para determinar la exposición a los antidepresivos metabolizados por CYP450 2D6 y 2C19 y la ausencia de inhibidores concomitantes de CYP 2D6 y 2C19. Se adjunta una lista de los antidepresivos metabolizados por CYP450 2D6 y 2C19 y sus inhibidores. Si se confirma la exposición, se entrevistará a cada sujeto utilizando la versión en inglés de la escala de calificación UKU (Udvalg for Kliniske Undersogelser)14 para evaluar retrospectivamente los efectos secundarios de los medicamentos metabolizados por las enzimas CYP 2D6 y 2C19. Usaremos los módulos 1, 3 y 4 de la UKU, para efectos secundarios "psíquicos", "autonómicos" y respectivamente "otros". Solo los pacientes que tuvieron efectos secundarios marcados por un medicamento o efectos secundarios moderados o marcados por dos medicamentos metabolizados por las enzimas CYP 2D6 y 2C19, de acuerdo con UKU, se incluirán en el grupo de TRATAMIENTO INTOLERANTE. Los sujetos que no presenten efectos adversos o que presenten efectos adversos leves se incluirán en el grupo CONTROL. Se espera que la entrevista con el sujeto dure aproximadamente noventa minutos y la llevará a cabo una subinvestigadora (Adriana Foster, MD).

Se pedirá a los participantes del estudio que se enjuaguen la boca con agua para eliminar las partículas de comida y que escupan la saliva en un recipiente de recolección hasta que el nivel del líquido alcance la línea indicada en el recipiente (~2 ml). Usaremos el kit de auto-recolección de ADN Oragene™ (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Canada).

El personal de investigación transportará la saliva a GEM Labs, ubicado en el campus de MCG. El ADN genómico se extraerá con el reactivo y el método proporcionado por el fabricante, Oragene. Esto se usará como plantilla para amplificar las regiones relevantes de CYP450 2D6 y 2C19. Los productos de la PCR se escindirán aleatoriamente en 50 a 100 pb mediante digestión con ADNasa I. Estos fragmentos se marcarán además con ficoeritrina (PE), un colorante fluorescente. Los fragmentos marcados con PE se hibridarán con el P450 Roche AmpliChip, se lavarán y escanearán con la estación de fluidos GeneChip automatizada 450Dx de Affymetrix y el escáner GeneChip 3000Dx de Affymetrix con el software operativo GeneChip Dx 1.1.3. Los datos serán analizados por AmpliChip CYP450_US Data Analysis para determinar el genotipo para 2D6 (evalúa totalmente 27 sitios de mutación, deleción y duplicación) y 2C19 (2 sitios de mutación). Los resultados del genotipado serán analizados por el mismo software para predecir el fenotipo (metabolizador ultrarrápido, extenso, intermedio y pobre).

En general, el estudio requiere solo una visita del participante; después de que se hayan completado la entrevista y la muestra de saliva, se cumplirá el papel del participante en la investigación. Este estudio se llevará a cabo en su totalidad en las instalaciones del Medical College of Georgia. Esperamos demostrar que la tasa de alelos 2D6 y 2C19 que se asocian con un estado metabolizador deficiente en la población intolerante al tratamiento superará con creces la tasa encontrada en la población de pacientes que toman antidepresivos sin efectos adversos.