Genetische Untersuchung von Leberenzymen bei Patienten mit Nebenwirkungen von Antidepressiva

Studiendesign Hierbei handelt es sich um eine naturalistische Studie mit 60 Patienten, darunter 30 Patienten, die signifikante Nebenwirkungen durch die Behandlung mit Antidepressiva hatten, die durch CYP2D6 und 2C19 metabolisiert werden (Behandlungsintoleranz-Gruppe) und 30 Patienten, die auf die Behandlung mit derselben Gruppe von Antidepressiva ohne diese ansprachen erhebliche Nebenwirkungen (KONTROLL-Gruppe). Die Studie wird voraussichtlich ein Jahr dauern.

Sobald die Rekrutierung, die Zustimmung des Probanden und die Kompetenz zur Teilnahme erreicht wurden, wird die Diagnose durch ein klinisches Interview beurteilt, unterstützt durch medizinische Unterlagen, sofern verfügbar. Es wird eine vollständige Medikamentenanamnese erstellt, die alle bekannten Medikamente, deren Dosierung und Anwendungsdauer umfasst, um die Exposition gegenüber durch CYP450 2D6 und 2C19 metabolisierten Antidepressiva und das Fehlen gleichzeitiger CYP 2D6- und 2C19-Inhibitoren zu bestimmen. Eine Liste der durch CYP450 2D6 und 2C19 metabolisierten Antidepressiva und ihrer Inhibitoren ist beigefügt. Wenn die Exposition bestätigt wird, wird jeder Proband anhand der englischen Version der UKU-Bewertungsskala (Udvalg for Kliniske Undersogelser)14 befragt, um retrospektiv seine Nebenwirkungen von Medikamenten zu bewerten, die durch die Enzyme CYP 2D6 und 2C19 metabolisiert werden. Wir nutzen die Module 1, 3 und 4 des UKU, für „psychische“, „autonome“ bzw. „sonstige“ Nebenwirkungen. In die Behandlungsintoleranz-Gruppe werden nur Patienten aufgenommen, bei denen laut UKU deutliche Nebenwirkungen eines Medikaments oder mittelschwere oder deutliche Nebenwirkungen zweier Medikamente auftraten, die durch die Enzyme CYP 2D6 und 2C19 metabolisiert werden. Probanden, die keine oder nur leichte Nebenwirkungen haben, werden in die KONTROLLgruppe aufgenommen. Das Probandeninterview wird voraussichtlich etwa neunzig Minuten dauern und von einer Unterermittlerin (Adriana Foster, MD) durchgeführt.

Die Studienteilnehmer werden gebeten, den Mund mit Wasser auszuspülen, um Speisereste zu entfernen, und Speichel in einen Auffangbecher zu spucken, bis der Flüssigkeitsstand die auf dem Behälter angegebene Linie (~2 ml) erreicht. Wir werden das Oragene™ DNA-Selbstsammelkit (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Kanada) verwenden.

Der Speichel wird von Forschungspersonal zu GEM Labs auf dem MCG-Campus transportiert. Die genomische DNA wird mit dem vom Hersteller Oragene bereitgestellten Reagenz und Verfahren extrahiert. Dies wird als Vorlage zur Amplifikation der relevanten Regionen von CYP450 2D6 und 2C19 verwendet. Die PCR-Produkte werden durch Verdau mit DNase I zufällig in 50 bis 100 bp gespalten. Diese Fragmente werden weiter mit Phycoerythrin (PE), einem Fluoreszenzfarbstoff, markiert. Die PE-markierten Fragmente werden mit dem P450 Roche AmpliChip hybridisiert, gewaschen und von der automatisierten GeneChip Fluidics Station 450Dx von Affymetrix und dem Affymetrix GeneChip Scanner 3000Dx mit der GeneChip Operating Software Dx 1.1.3 gescannt. Die Daten werden von AmpliChip CYP450_US Data Analysis analysiert, um den Genotyp für 2D6 (es werden insgesamt 27 Mutationsstellen, Deletion und Duplikation bewertet) und 2C19 (2 Mutationsstellen) zu bestimmen. Die Ergebnisse der Genotypisierung werden von derselben Software analysiert, um den Phänotyp vorherzusagen (ultraschneller, umfangreicher, mittlerer und schlechter Metabolisierer).

Insgesamt erfordert die Studie nur einen Besuch des Teilnehmers; Nachdem das Interview und die Speichelprobe abgeschlossen sind, ist die Rolle des Teilnehmers in der Forschung erfüllt. Diese Studie wird vollständig in den Einrichtungen des Medical College of Georgia durchgeführt. Wir hoffen, zeigen zu können, dass die Rate der 2D6- und 2C19-Allele, die mit einem schlechten Metabolisiererstatus in der behandlungsintoleranten Population verbunden sind, die Rate bei der Patientenpopulation, die Antidepressiva ohne Nebenwirkungen einnimmt, bei weitem übersteigt.