Genetische studie van leverenzymen bij patiënten met bijwerkingen van antidepressiva

Onderzoeksopzet Dit is een naturalistische studie van zestig patiënten, waaronder 30 patiënten die significante nevenreacties hadden van de behandeling met antidepressiva gemetaboliseerd door CYP2D6 en 2C19 (groep TREATMENT-INTOLERANT) en 30 patiënten die reageerden op behandeling met dezelfde groep antidepressiva zonder significante bijwerkingen (CONTROLE-groep). Het onderzoek zal naar verwachting een jaar duren.

Zodra werving, toestemming van de proefpersoon en competentie om deel te nemen zijn bereikt, zal de diagnose worden beoordeeld door middel van een klinisch interview, indien beschikbaar ondersteund door medische dossiers. Er zal een volledige medicatiegeschiedenis worden afgenomen, inclusief alle bekende medicijnen, hun doses en gebruiksduur, om de blootstelling aan antidepressiva die worden gemetaboliseerd door CYP450 2D6 en 2C19 en de afwezigheid van gelijktijdige CYP 2D6- en 2C19-remmers te bepalen. Een lijst van de antidepressiva die worden gemetaboliseerd door CYP450 2D6 en 2C19 en hun remmers is bijgevoegd. Als blootstelling wordt bevestigd, wordt elke proefpersoon geïnterviewd met behulp van de Engelse versie van UKU (Udvalg for Kliniske Undersogelser) Rating Scale14 om achteraf hun bijwerkingen te beoordelen van medicijnen die worden gemetaboliseerd door CYP 2D6- en 2C19-enzymen. We zullen de modules 1, 3 en 4 van de UKU gebruiken, voor "psychische", "autonome" en respectievelijk "overige" bijwerkingen. Alleen patiënten die duidelijke bijwerkingen hadden van één medicijn of matige of duidelijke bijwerkingen van twee medicijnen gemetaboliseerd door CYP 2D6- en 2C19-enzymen, volgens UKU, zullen worden opgenomen in de BEHANDELING-INTOLERANT-groep. Proefpersonen die geen of milde bijwerkingen hebben, worden opgenomen in de CONTROL-groep. Het interview met de proefpersoon zal naar verwachting ongeveer negentig minuten duren en zal worden uitgevoerd door een subonderzoeker (Adriana Foster, MD).

De deelnemers aan de studie wordt gevraagd hun mond met water te spoelen om voedseldeeltjes te verwijderen en speeksel in een opvangbeker te spugen totdat het vloeistofniveau de lijn bereikt die op de container is aangegeven (~ 2 ml). We zullen Oragene ™ DNA-zelfverzamelingskit gebruiken (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Canada).

Het speeksel wordt door onderzoeksmedewerkers naar GEM Labs op de MCG-campus getransporteerd. Het genomische DNA wordt geëxtraheerd met het reagens en de methode geleverd door de fabrikant, Oragene. Dit zal worden gebruikt als sjabloon om de relevante regio's van CYP450 2D6 en 2C19 te versterken. De PCR-producten zullen willekeurig worden gesplitst in 50 tot 100 bp door digestie met DNase I. Deze fragmenten zullen verder worden gelabeld met phycoerythrin (PE), een fluorescerende kleurstof. De PE-gelabelde fragmenten zullen worden gehybridiseerd met de P450 Roche AmpliChip, gewassen en gescand door het Affymetrix geautomatiseerde GeneChip fluidics Station 450Dx en de Affymetrix GeneChip scanner 3000Dx met GeneChip Operating Software Dx 1.1.3. De gegevens zullen worden geanalyseerd door AmpliChip CYP450_US Data Analysis om het genotype te bepalen voor 2D6 (het beoordeelt in totaal 27 mutatieplaatsen, deletie en duplicatie) en 2C19 (2 mutatieplaatsen). Genotyperingsresultaten zullen door dezelfde software worden geanalyseerd om het fenotype te voorspellen (ultrasnelle, uitgebreide, gemiddelde en slechte metaboliseerder).

Over het algemeen vereist het onderzoek slechts één bezoek van de deelnemer; nadat het interview en het speekselmonster zijn afgerond, is de rol van de deelnemer in het onderzoek vervuld. Deze studie zal in zijn geheel worden uitgevoerd in de faciliteiten van het Medical College of Georgia. We hopen aan te tonen dat de snelheid van 2D6- en 2C19-allelen die geassocieerd zijn met een slechte metaboliseerderstatus in de behandelingsintolerante populatie veel hoger zal zijn dan de snelheid die wordt gevonden in de patiëntenpopulatie die antidepressiva gebruikt zonder nadelige effecten.