Geneettinen tutkimus maksaentsyymeistä potilailla, joilla on masennuslääkkeiden sivuvaikutuksia

Tutkimussuunnitelma Tämä on naturalistinen kuudenkymmenen potilaan tutkimus, johon kuuluu 30 potilasta, joilla oli merkittäviä sivuvaikutuksia hoidosta CYP2D6:n ja 2C19:n kautta metaboloituvilla masennuslääkkeillä (HOITO-INTOLERANTTIryhmä) ja 30 potilasta, jotka reagoivat hoitoon samalla masennuslääkeryhmällä ilman merkittäviä haittavaikutuksia (CONTROL-ryhmä). Tutkimuksen odotetaan kestävän vuoden.

Kun rekrytointi, koehenkilön suostumus ja osallistumispätevyys on saavutettu, diagnoosi arvioidaan kliinisen haastattelun avulla, ja mahdollisten potilastietojen avulla. Täydellinen lääkityshistoria, mukaan lukien kaikki tunnetut lääkkeet, niiden annokset ja käytön kesto, otetaan selville altistumisesta CYP450 2D6:n ja 2C19:n kautta metaboloituville masennuslääkkeille ja samanaikaisten CYP 2D6- ja 2C19-estäjien puuttuminen. Liitteenä on luettelo CYP450 2D6 ja 2C19 metaboloimista masennuslääkkeistä ja niiden estäjistä. Jos altistuminen varmistuu, jokaista koehenkilöä haastatellaan käyttämällä UKU:n (Udvalg for Kliniske Undersogelser) luokitusasteikkoa14, jotta voidaan arvioida takautuvasti heidän CYP 2D6- ja 2C19-entsyymien metaboloimien lääkkeiden sivuvaikutuksia. Käytämme UKU:n moduuleja 1, 3 ja 4 "psyykkisiin", "autonomisiin" ja vastaavasti "muihin" sivuvaikutuksiin. Ainoastaan ​​potilaat, joilla on ollut merkittäviä sivuvaikutuksia yhdestä lääkkeestä tai joko kohtalaisia ​​tai merkittäviä sivuvaikutuksia kahdesta CYP 2D6- ja 2C19-entsyymeillä metaboloituvasta lääkkeestä UKU:n mukaan, sisällytetään HOITO-INTOLERANTTI-ryhmään. Koehenkilöt, joilla ei ole mitään haittavaikutuksia tai joilla on lieviä haittavaikutuksia, sisällytetään CONTROL-ryhmään. Kohdehaastattelun odotetaan kestävän noin 90 minuuttia, ja sen suorittaa osatutkija (Adriana Foster, MD).

Tutkimukseen osallistujia pyydetään huuhtelemaan suu vedellä ruokahiukkasten poistamiseksi ja sylkemään sylkeä keräyskuppiin, kunnes nestetaso saavuttaa astiaan merkityn viivan (~2 ml). Käytämme Oragene ™ DNA:n itsekeräyssarjaa (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Kanada).

Tutkimushenkilöstö kuljettaa syljen MCG-kampuksella sijaitsevaan GEM Labsiin. Genominen DNA uutetaan valmistajan Oragenen toimittamalla reagenssilla ja menetelmällä. Tätä käytetään mallina CYP450 2D6:n ja 2C19:n asiaankuuluvien alueiden vahvistamiseen. PCR-tuotteet pilkotaan satunnaisesti 50-100 emäspariksi pilkkomalla DNaasi I:llä. Nämä fragmentit leimataan edelleen fykoerytriinillä (PE), fluoresoivalla väriaineella. PE-leimatut fragmentit hybridisoidaan P450 Roche AmpliChipiin, pestään ja skannataan Affymetrixin automatisoidulla GeneChip-fluidiikkaasemalla 450Dx ja Affymetrix GeneChip -skannerilla 3000Dx, jossa on GeneChip Operating Software Dx 1.1.3. Tiedot analysoidaan AmpliChip CYP450_US -dataanalyysillä genotyypin määrittämiseksi 2D6:lle (se arvioi 27 mutaatiokohtaa, deleetion ja duplikaation) ja 2C19:n (2 mutaatiokohtaa) genotyypin. Genotyypityksen tulokset analysoidaan samalla ohjelmistolla fenotyypin ennustamiseksi (erittäin nopea, laaja, keskitasoinen ja heikko metaboloija).

Kaiken kaikkiaan tutkimus vaatii vain yhden käynnin osallistujalta; haastattelun ja sylkinäytteen ottamisen jälkeen osallistujan rooli tutkimuksessa täyttyy. Tämä tutkimus suoritetaan kokonaisuudessaan Georgian Medical Collegen tiloissa. Toivomme voivamme osoittaa, että 2D6- ja 2C19-alleelien määrä, joka liittyy huonoon metaboloijan tilaan hoito-intolerantissa populaatiossa, ylittää huomattavasti potilasjoukon, joka käyttää masennuslääkkeitä ilman haittavaikutuksia.