Генетическое исследование ферментов печени у пациентов с побочными эффектами антидепрессантов

Дизайн исследования Это натуралистическое исследование шестидесяти пациентов, в которое войдут 30 пациентов, у которых были побочные значимые побочные реакции на лечение антидепрессантами, метаболизируемыми CYP2D6 и 2C19 (группа ЛЕЧЕНИЕ-НЕПЕРЕНОСИМОСТЬ), и 30 пациентов, которые ответили на лечение той же группой антидепрессантов без значительные побочные эффекты (группа КОНТРОЛЬ). Ожидается, что исследование продлится один год.

После набора, согласия субъекта и компетентности для участия диагноз будет оцениваться посредством клинического интервью с использованием медицинских записей, если таковые имеются. Будет собран полный анамнез приема лекарств, включая все известные лекарства, их дозы и продолжительность использования, чтобы определить воздействие антидепрессантов, метаболизируемых CYP450 2D6 и 2C19, и отсутствие сопутствующих ингибиторов CYP 2D6 и 2C19. Список антидепрессантов, метаболизируемых CYP450 2D6 и 2C19, и их ингибиторов прилагается. Если воздействие будет подтверждено, каждый субъект будет опрошен с использованием рейтинговой шкалы UKU (Udvalg для Kliniske Undersogelser)14 на английском языке для ретроспективной оценки их побочных эффектов от лекарств, метаболизируемых ферментами CYP 2D6 и 2C19. Мы будем использовать модули 1, 3 и 4 UKU для «психических», «вегетативных» и, соответственно, «других» побочных эффектов. Только пациенты, у которых наблюдались выраженные побочные эффекты от одного препарата или умеренные или выраженные побочные эффекты от двух препаратов, метаболизирующихся ферментами CYP 2D6 и 2C19, в соответствии с UKU, будут включены в группу ЛЕЧЕНИЕ-НЕПЕРЕНОСИМОСТЬ. Субъекты, у которых не было никаких побочных эффектов или у которых были легкие побочные эффекты, будут включены в КОНТРОЛЬНУЮ группу. Ожидается, что интервью с субъектом продлится примерно девяносто минут и будет проводиться младшим следователем (Адриана Фостер, доктор медицины).

Участников исследования попросят прополоскать рот водой, чтобы удалить частицы пищи, и сплюнуть слюну в чашку для сбора, пока уровень жидкости не достигнет линии, указанной на контейнере (~ 2 мл). Мы будем использовать набор для самостоятельного сбора ДНК Oragene™ (DNA Genotek, Inc, Оттава, Онтарио, Канада).

Слюна будет доставлена ​​в GEM Labs, расположенную в кампусе MCG, научным персоналом. Геномная ДНК будет извлечена с помощью реагента и метода, предоставленного производителем Oragene. Это будет использоваться в качестве шаблона для амплификации соответствующих областей CYP450 2D6 и 2C19. Продукты ПЦР будут случайным образом расщеплены на 50–100 п.н. путем расщепления ДНКазой I. Эти фрагменты будут дополнительно помечены фикоэритрином (PE), флуоресцентным красителем. Фрагменты, меченные PE, будут гибридизированы с P450 Roche AmpliChip, промыты и просканированы с помощью автоматизированной станции Affymetrix GeneChip Fluidics Station 450Dx и сканера Affymetrix GeneChip 3000Dx с операционным программным обеспечением GeneChip Dx 1.1.3. Данные будут проанализированы с помощью AmpliChip CYP450_US Data Analysis для определения генотипа 2D6 (всего оцениваются 27 сайтов мутаций, делеций и дупликаций) и 2C19 (2 сайта мутаций). Результаты генотипирования будут проанализированы тем же программным обеспечением для прогнозирования фенотипа (сверхбыстрый, экстенсивный, промежуточный и плохой метаболизатор).

В целом, исследование требует только одного визита участника; после завершения интервью и взятия образца слюны роль участника в исследовании будет выполнена. Это исследование будет полностью проведено на базе Медицинского колледжа Джорджии. Мы надеемся продемонстрировать, что уровень аллелей 2D6 и 2C19, которые связаны с плохим статусом метаболизатора в популяции, не переносящей лечение, будет намного превышать уровень, обнаруженный в популяции пациентов, которые принимают антидепрессанты без побочных эффектов.