Studio genetico degli enzimi epatici in pazienti con effetti collaterali da antidepressivi

Disegno dello studio Si tratta di uno studio naturalistico su sessanta pazienti, che includerà 30 pazienti che hanno avuto reazioni avverse collaterali significative dal trattamento con antidepressivi metabolizzati da CYP2D6 e 2C19 (gruppo TREATMENT-INTOLERANT) e 30 pazienti che hanno risposto al trattamento con lo stesso gruppo di antidepressivi senza effetti avversi significativi (gruppo CONTROLLO). Lo studio dovrebbe durare un anno.

Una volta ottenuto il reclutamento, il consenso del soggetto e la competenza a partecipare, la diagnosi sarà valutata attraverso colloquio clinico, aiutato da cartelle cliniche, se disponibili. Verrà presa una storia completa dei farmaci, inclusi tutti i farmaci noti, le loro dosi e la durata dell'uso, per determinare l'esposizione agli antidepressivi metabolizzati dal CYP450 2D6 e 2C19 e l'assenza di concomitanti inibitori del CYP 2D6 e 2C19. In allegato un elenco degli antidepressivi metabolizzati dal CYP450 2D6 e 2C19 e dei loro inibitori. Se l'esposizione è confermata, ogni soggetto sarà intervistato utilizzando la versione inglese della UKU (Udvalg per Kliniske Undersogelser) Rating Scale14 per valutare retrospettivamente i loro effetti collaterali dai farmaci metabolizzati dagli enzimi CYP 2D6 e 2C19. Useremo i moduli 1, 3 e 4 dell'UKU, per gli effetti collaterali "psichici", "autonomici" e rispettivamente "altri". Solo i pazienti che hanno avuto effetti collaterali marcati da un farmaco o effetti collaterali moderati o marcati da due farmaci metabolizzati dagli enzimi CYP 2D6 e 2C19, secondo UKU, saranno inclusi nel gruppo TRATTAMENTO-INTOLLERANTE. I soggetti che non hanno effetti avversi lievi o assenti, saranno inclusi nel gruppo CONTROLLO. L'intervista al soggetto dovrebbe durare circa novanta minuti e sarà condotta da un subinvestigatore (Adriana Foster, MD).

Ai partecipanti allo studio verrà chiesto di sciacquare la bocca con acqua per rimuovere le particelle di cibo e sputare la saliva in una tazza di raccolta fino a quando il livello del liquido raggiunge la linea indicata sul contenitore (~ 2 ml). Useremo il kit di auto-raccolta del DNA Oragene ™ (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Canada).

La saliva sarà trasportata ai laboratori GEM, situati nel campus MCG, dal personale di ricerca. Il DNA genomico verrà estratto con il reagente e il metodo forniti dal produttore, Oragene. Questo verrà utilizzato come modello per amplificare le regioni rilevanti di CYP450 2D6 e 2C19. I prodotti di PCR saranno scissi casualmente in 50-100 bp mediante digestione con DNasi I. Questi frammenti saranno ulteriormente marcati con ficoeritrina (PE), un colorante fluorescente. I frammenti marcati con PE saranno ibridati al P450 Roche AmpliChip, lavati e scansionati dalla stazione di fluidica automatizzata Affymetrix GeneChip 450Dx e dallo scanner Affymetrix GeneChip 3000Dx con software operativo GeneChip Dx 1.1.3. I dati saranno analizzati da AmpliChip CYP450_US Data Analysis per determinare il genotipo per 2D6 (valuta totalmente 27 siti di mutazione, delezione e duplicazione) e 2C19 (2 siti di mutazione). I risultati della genotipizzazione saranno analizzati dallo stesso software per prevedere il fenotipo (ultrarapido, estensivo, intermedio e scarso metabolizzatore).

Nel complesso, lo studio richiede una sola visita da parte del partecipante; dopo che l'intervista e il campione di saliva sono stati completati, il ruolo del partecipante nella ricerca sarà svolto. Questo studio sarà svolto nella sua interezza presso le strutture del Medical College of Georgia. Speriamo di dimostrare che il tasso di alleli 2D6 e 2C19 associati a uno stato di metabolizzatore scarso nella popolazione intollerante al trattamento supererà di gran lunga il tasso riscontrato nella popolazione di pazienti che assume antidepressivi senza effetti avversi.